Cill Díreach RT qPCR Kit - Taqman Direct Cealla Lysis Cill Réidh Aon-chéim Feisteáin qRT-PCR Tóraigh
Cur síos
Úsáideann an táirge seo córas maoláin lysis uathúil chun RNA a scaoileadh go tapa ó shamplaí cille saothraithe le haghaidh imoibrithe RT-qPCR, deireadh a chur leis an bpróiseas íonú RNA am-íditheach agus saothair, agus gan ach 7 nóiméad chun an teimpléad RNA riachtanach a fháil, leis an 5 × Direct RT Mix, 2 × Direct qPCR Mix-Taqman a sholáthraíonn an trealamh is féidir torthaí fíor-ama PCR a fháil go tapa agus go héifeachtach.
Tá lamháltas láidir coscaire ag 5 × Direct RT Mix agus 2 × Direct qPCR Mix-Taqman agus is féidir leo aisiompú éifeachtach agus aimpliú sonrach a dhéanamh trí úsáid a bhaint as lysate an tsampla atá le tomhas mar theimpléad.San imoibrí tá Foregene Reverse Transcriptase, Hot D-Taq DNA Polymerase, dNTPs, MgCl2, Maolán Imoibrithe, PCR Optimizer agus Cobhsaitheoir, is féidir a úsáid le maolán lysis chun samplaí a bhrath go tapa agus go héasca, agus tá tréithe ard-íogaireacht, sainiúlacht agus cobhsaíocht aige.
Sonraíochtaí
200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns
Comhpháirteanna Kit
| QuickEasyTMCill Díreach RT-qPCR Kit-Taqman | ||||
| Comhpháirteanna Kit Córas Imoibrithe 20μl qPCR | DRt-01021 | DRt-01022 | Nóta | |
| 200 T | 1000 T | |||
|
Cuid I | Maolán CL | 4 ml | 20 ml | Cille Lysis |
| Foregene Protease Plus II | 80 μl | 400 μl | ||
| Maolán ST | 400 μl | 1 ml × 2 | ||
|
Cuid II | Léirscriosán DNA | 80 μl | 400 μl | |
| 5 × Meascán Díreach RT * | 160 μl | 800 μl | RT | |
| 2× Direct qPCR Mix-Taqman * | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 | qPCR | |
| Dath Tagartha 20×ROX | 40 μl | 200 μl | ||
| RNase-DDH saor in aisce2O | 1.7 ml | 10 ml | ||
| Lámhleabhar Treoraithe | 1 píosa | 1 píosa | ||
*:Is féidir Cell Lysis, 5× Direct RT Mix, 2× Direct qPCR Mix-Taqman a cheannach ar leithligh
Gnéithe agus buntáistí
■Simplí agus éifeachtach : le teicneolaíocht Cell Direct RT, is féidir samplaí RNA a fháil i díreach 7 nóiméad.
■ Tá an t-éileamh samplach beag, chomh híseal agus is féidir 10 gcealla a thástáil.
■ Tréchur ard: féadann sé RNA a bhrath go tapa i gcealla saothraithe i 384, 96, 24, 12, plátaí 6 thobair.
■ Is féidir le scriosán DNA géanóim scaoilte a bhaint go tapa, an tionchar ar thorthaí turgnamhacha ina dhiaidh sin a laghdú go mór.
■ Déanann córas optamaithe RT agus qPCR an trascríobh droim ar ais RT-PCR dhá chéim níos éifeachtaí agus PCR níos sainiúla, agus níos resistant d'inhibitors imoibriú RT-qPCR.
Feidhmchlár Kit
Scóip an iarratais: cealla saothraithe.
- RNA arna scaoileadh ag lysis samplach: infheidhme ach amháin maidir le teimpléad RT-qPCR den trealamh seo.
- Is féidir an trealamh a úsáid chun na críocha seo a leanas: anailís ar léiriú géine, fíorú éifeacht tosta géine trí mheán siRNA, scagadh drugaí, etc.
Stóráil agus Seilfré
Ba cheart Cuid I den trealamh seo a stóráil ag 4℃;Ba chóir Cuid II a stóráil ag -20 ℃.
Ba cheart Foregene Protease Plus II a stóráil ag 4℃, ná reoite ag -20 ℃.
Imoibrí 2×Ba chóir go díreach qPCR Mix-Taqman a stóráil ag -20℃sa dorchadas ;má úsáidtear é go minic, is féidir é a stóráil ag 4 freisin℃ le haghaidh stórála gearrthéarmach (úsáid suas laistigh de 10 lá).
Prionsabail deartha fíor-ama PCR primer
Ar Aghaidh Primer agus Droim ar ais Primer
Maidir le PCR Fíor-ama, tá dearadh primer an-tábhachtach.Tá baint ag primers le sainiúlacht agus le héifeachtúlacht an aimplithe PCR, agus is féidir iad a dhearadh ag tagairt do na prionsabail seo a leanas:
- Fad primer: 18-30bp.
- Ábhar GC: 40-60%.
- Luach Tm: Is féidir le bogearraí deartha primer, mar shampla Primer 5, luach Tm an primer a thabhairt.Ba cheart go mbeadh luachanna Tm na bpriméirí in aghaidh an tsrutha agus iartheachtach chomh gar agus is féidir.Is féidir an fhoirmle ríomh Tm a úsáid freisin: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Nuair a bhíonn PCR á fheidhmiú, roghnaítear teocht faoi bhun luach an primer Tm de 5 °C mar an teocht anáil (is féidir leis an méadú comhfhreagrach ar an teocht annealaithe sainiúlacht an imoibrithe PCR a mhéadú).
- Primers agus táirgí PCR:
- Dearadh primer PCR fad táirge aimpliú is fearr 100-150bp.
- Ba cheart primers dearaidh i limistéar struchtúrach tánaisteach an teimpléid a sheachaint oiread agus is féidir.
- Seachain foirmiú 2 bhonn chomhlántacha nó níos mó idir na 3′ foircinn na primers in aghaidh an tsrutha agus le sruth.
- Ní féidir le bonn teirminéil primer 3′ a bheith i láthair le 3 G nó C breise as a chéile.
- Ní féidir struchtúir chomhlántacha a bheith ag na primers féin, nó cruthófar struchtúr hairpin, a dhéanann difear d'aimpliú PCR.
- Ba cheart ATCG a dháileadh chomh cothrom agus is féidir sa seicheamh primer, agus ba cheart an bonn teirminéil 3′ a sheachaint mar T.
Aguisín1:Cell DíreachRT-qPCR Comhpháirt Kitt pacáiste forlíonta
Réiteach Lysis 1.Cell
| Réiteach Lysis Cell | |||
| Comhpháirteanna Kit (córas lysis 24-tobar / tobar) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 T | 500 T | ||
| Cuidmé | Maolán CL | 20 ml | 100 ml |
| Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
| Maolán ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
| CuidII | Léirscriosán DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
| Meascán RT | |
| Comhpháirteanna Kit (córas imoibrithe 20 μl) | DRT-01011-B1 |
| 200 T | |
| 5 × Meascán RT Díreach | 800 μl |
| RNase-DDH saor in aisce2O | 1,7 ml × 2 |
| Meascán qPCR | ||
| Comhpháirteanna Kit (córas imoibrithe 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
| 200 T | 1000 T | |
| 2 × Díreach qPCR Measc-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
| Dath Tagartha 20 × ROX | 40 μl | 200 μl |
| RNase-DDH saor in aisce2O | 1.7 ml | 10 ml |
Lámhleabhair Treoraithe:
