Ceall Trealamh Leithlisithe RNA Iomlán Trealamh Íonúcháin Leithlisithe RNA Iomlán ó chill
Cur Síos Kit:
Is féidir RNA iomlán ardíonachta agus ardcháilíochta a fháil ó chealla saothraithe éagsúla i 11 nóiméad.
RNase-Saor in Aisce
Oibrithe ag teocht an tseomra (15-25 ℃)
Le Colún Glanadh DNA
Toradh ard RNA
Fast: Críochnaigh eastóscadh i 11 nóiméad
Sábháilteacht: Níl aon Cheimiceach Orgánach
Cur síos
Úsáideann an trealamh seo an colún casadh agus an fhoirmle a d'fhorbair Foregene, ar féidir leis RNA iomlán ard-íonachta agus ardchaighdeáin a bhaint go héifeachtach as cealla saothraithe i bplátaí 96, 24, 12, agus 6-tobair.
Soláthraíonn an paca Colún Glantacháin DNA éifeachtach, ar féidir leis an sárshaothar agus an lysate cille a dheighilt go héasca, DNA géanómach a cheangal agus a bhaint.Tá an oibríocht simplí agus coigilte ama.
Tis féidir leis an gColún RNA-amháin RNA a cheangal go héifeachtach le foirmle uathúil.Is féidir líon mór samplaí a phróiseáil ag an am céanna.
Comhpháirteanna Kit
| Comhdhéanamh Kit | RE-03111 | RE-03114 |
| 50 T | 200 T | |
| Maolán cRL1* | 25 ml | 100 ml |
| Maolán cRL2 | 15 ml | 60 ml |
| Maolán RW1* | 25 ml | 100 ml |
| Maolán RW2 | 24 ml | 96 ml |
| RNase-Free ddH2O | 10 ml | 40 ml |
| RNA-Colún Amháin | 50 | 200 |
| Colún Glanadh DNA | 50 | 200 |
| Teagasc | 1 | 1 |
*Caith lámhainní le do thoil agus déan bearta cosanta le linn na hoibríochta mar go bhfuil salainn chaotrópacha greannacha i Buffer cRL1 agus Buffer RW1.
Gnéithe agus buntáistí
■ Oibrítear an próiseas iomlán ag teocht an tseomra (15-25 ℃), gan folcadán oighir agus lártheifneoiriú teocht íseal.
■ Tá an trealamh iomlán saor ó RNase, ní gá a bheith buartha faoi dhíghrádú RNA.
■ Ceanglaíonn Colún Glantacháin DNA DNA go sonrach, ionas gur féidir leis an trealamh éilliú DNA géanómach a bhaint gan DNase breise a chur leis.
■ Toradh ard RNA: Is féidir le Colún RNA amháin agus foirmle uathúil RNA a íonú go héifeachtach.
■ Luas tapa: éasca le feidhmiú agus is féidir é a chríochnú i 11 nóiméad.
■ Sábháilteacht: Níl aon imoibrí orgánach ag teastáil.
■ Ardchaighdeán: Tá an RNA íonaithe ard-íonachta, saor ó phróitéin agus neamhíonachtaí eile, agus is féidir leis turgnaimh éagsúla ina dhiaidh sin a chomhlíonadh.
Feidhmchlár Kit
Tá sé oiriúnach le haghaidh eastóscadh agus íonú RNA iomlán ó chealla saothraithe i plátaí 96, 24, 12, agus 6-tobar.
Sreabhadh oibre
Léaráid
Dhéileáil an léaráid ceallraí glóthach agarose de Kit Leithlisiú Iomlán Cill RNA leis na huimhreacha difriúla thuas de chealla, elution toirte 20μl, tóg RNA iomlán íonaithe 2μl 1%.
Stóráil agus seilfré
Is féidir an trealamh a stóráil ar feadh 12 mhí ag teocht an tseomra (15-25 ℃) nó 2-8 ℃ ar feadh tréimhse níos faide (24 mí).
Is féidir maolán cRL1 a stóráil ag 4 ℃ ar feadh 1 mhí tar éis 2-hiodrocsa-1-ethanethiol (roghnach) a chur leis.
Ní bhaintear RNA nó tá táirgeacht RNA íseal
Is minic go mbíonn fachtóirí éagsúla ann a théann i bhfeidhm ar éifeachtúlacht aisghabhála, mar shampla: ábhar RNA sampla fíocháin, modh oibríochta, toirt elution, etc.
1. Rinneadh lártheifneoiriú folctha oighir nó crióigineach (4 °C) le linn oibríochta.
Moladh: Oibriú ag teocht an tseomra (15-25 ° C) le linn an phróisis iomláin, ná folcadáin oighir agus lártheifneoir ag teocht íseal.
2. Caomhnú samplach míchuí nó am stórála samplach iomarcach.
Moladh: Stóráil samplaí ag -80 °C nó reo i nítrigin leachtach agus seachain úsáid reo-leá arís;déan iarracht fíochán úr nó cealla saothraithe a úsáid le haghaidh eastóscadh RNA.
3. lysis sampla neamhleor.
Moladh: Nuair a dhéantar fíocháin a homogenú, cinntigh go bhfuil an fíochán homogenized go leor agus go bhfuil na cealla fíocháin roinnte go leor chun scaoileadh RNA a mhíniú.
4. Ní chuirtear an t-eilimint leis i gceart.
Moladh: Deimhnigh go bhfuil ddH saor ó RNase2Cuirtear O le drogall ar lár an scannáin cholúin íonúcháin.
5. Níor cuireadh an méid ceart eatánóil absalóideach le Buffer RL2 nó Buffer RW2.
Moladh: Lean na treoracha, cuir an méid ceart eatánóil absalóideach le Buffer RL2 agus Buffer RW2 agus measc go maith sula n-úsáideann tú an trealamh.
6. Níl dáileog sampla fíocháin oiriúnach.
Moladh: Úsáid 10-20 mg fíocháin nó (1-5) × 106cealla in aghaidh 500 μl maolán RL1, toisc go bhféadfadh eastóscadh RNA laghdaithe a bheith mar thoradh ar úsáid iomarcach fíocháin.
7. Toirt elution míchuí nó elution neamhiomlán.
Moladh: Is é méid elution an cholúin íonúcháin 50-200 μl;mura bhfuil an éifeacht elution sásúil, moltar an t-am socrúcháin teocht an tseomra a leathnú tar éis ddH RNase-Free réamhthéite a chur leis2O, m.sh. ar feadh 5-10 min.
8.Tá iarmhar eatánóil ag an gcolún íonú tar éis nigh Buffer RW2.
Moladh: Má tá iarmhar eatánól tar éis níocháin Buffer RW2, lártheifneoiriú feadán folamh ar feadh 1min, is féidir an t-am le haghaidh oibríocht lártheifneoirithe feadán folamh a mhéadú go 2min, nó is féidir an colún íonú a chur ag teocht an tseomra ar feadh 5 nóiméad chun an eatánól iarmharach a bhaint go leordhóthanach.
Tá RNA íonaithe díghrádaithe
Tá baint ag cáilíocht an RNA íonaithe le fachtóirí cosúil le caomhnú an tsampla, éilliú RNase, agus ionramháil, etc.
1. Ní choinnítear samplaí fíocháin in am.
Moladh: Mura n-úsáidtear samplaí fíocháin nó cealla go tráthúil tar éis iad a bhailiú, crióchoimeád láithreach ag -80 °C nó nítrigin leachtach.Chun RNA a bhaint as, bain úsáid as sampla fíocháin nó cealla nua-thógtha nuair is féidir.
2. Samplaí fíocháin a reo arís agus arís eile.
Moladh: Agus samplaí fíocháin á stóráil, is fearr iad a ghearradh ina bpíosaí beaga le caomhnú, agus ceann de na píosaí a bhaint agus iad á n-úsáid chun reo-leá an tsampla arís agus arís eile agus díghrádú RNA a sheachaint.
3. Tugtar isteach RNase nó gan lámhainní indiúscartha, maisc, etc. a chaitheamh le linn na hoibríochta.
Moladh: Is fearr turgnaimh eastósctha RNA a dhéanamh i seomraí ionramhála RNA ar leith agus déantar an tábla a ghlanadh roimh an turgnamh.
Caith lámhainní agus maisc indiúscartha le linn an turgnaimh chun díghrádú RNA de bharr tabhairt isteach RNase a íoslaghdú.
4. Tá imoibrithe éillithe le RNase le linn úsáide.
Moladh: Fearas nua Leithlisithe RNA Iomlán Ainmhithe a chur ina ionad le haghaidh turgnaimh ghaolmhara.
5. Tá na feadáin lártheifneora, leideanna, etc. a úsáidtear i ionramháil RNA éillithe le RNase.
Moladh: Deimhnigh go bhfuil na feadáin lártheifneoir, na leideanna, na pípéid, etc. a úsáidtear in eastóscadh RNA ar fad saor ó RNase.
Bíonn tionchar ag RNA a fhaightear íonaithe ar thurgnaimh iartheachtacha
RNA íonaithe ag an gcolún íonú, má tá na hiain salainn, tá cion próitéin ró-mhór, beidh tionchar acu ar an turgnamh le sruth, mar shampla: trascríobh droim ar ais, Northern Blot et al.
1. Tá iarmhair ian salainn ag an RNA elutioned.
Moladh: Deimhnigh go bhfuil an toirt ceart eatánóil curtha le Buffer RW2 agus déan 2 nite colún íonúcháin ag an luas lártheifeacha atá sonraithe le haghaidh oibriú;má tá aon iarmhar ian salainn ann, fág an colún íonúcháin go Buffer RW2 ar feadh 5 nóiméad ag teocht an tseomra agus déan lártheifneoiriú chun deireadh a chur le héilliú salainn a uasmhéadú.
2. Iarmhar eatánóil in RNA elutioned.
Moladh: Deimhnigh, tar éis níocháin maolán RW2, an oibríocht lártheifneoirithe feadáin folamh a dhéanamh ag an luas lártheifneoirithe a shonraítear le haghaidh oibriú, méadú ar am oibríocht lártheifneoirithe an fheadáin folamh go 2 nóiméad má tá iarmhar eatánóil fós ann, nó é a fhágáil ag teocht an tseomra ar feadh 5 m.
