Trealamh Leithlisithe RNA Iomlán d'Ainmhithe Trealamh um Eastóscadh agus Íonú RNA Iomlán d'Fhíocháin Ainmhithe & Ceall
Cur Síos Kit:
Baintear RNA iomlán ard-íonachta agus ardchaighdeáin go tapa agus go héifeachtach ó fhíocháin ainmhithe éagsúla.
Ní gá a bheith buartha faoi dhíghrádú RNA.Tá an córas iomlán saor ó RNase
Bain úsáid as DNA go héifeachtach ag baint úsáide as Colún Glantacháin DNA
Bain DNA gan DNA a chur leis
Simplí - déantar na hoibríochtaí go léir ag teocht an tseomra
Fast - is féidir oibríocht a chríochnú i 30 nóiméad
Sábháilte - ní úsáidtear aon imoibrí orgánach
Ard-íonacht - OD260/280≈1.8-2.1
Cur síos ar threalamh
50 Preps, 200 Preps
Úsáideann an trealamh seo ancolún casadh agus foirmleforbartha ag ár gcuideachta, is féidir a bhaint as ard-íonachta agus ard-chaighdeán RNA iomlán ó fíocháin ainmhithe éagsúla le éifeachtacht ard. Soláthraíonn sé Colún DNA-Glanadh éifeachtach, is féidir a scaradh go héasca agus a adsorb DNA genomic as an supernatant agus fíocháin lysate, simplí agus am-shábháil;Is féidir le Colún RNA amháin RNA a cheangal go héifeachtach agus is féidir é a phróiseáil go comhuaineach le foirmle uathúil Go leor samplaí.
Tá an córas iomlán RNase-Free, ionas nach mbeidh an RNA bhaintear díghrádaithe;Maolán RW1, córas níocháin maolán RW2 Maolán, ionas go mbeidh an RNA a fhaightear saor ó thruailliú próitéine, DNA, ian agus cumaisc orgánacha.
Comhpháirteanna Kit
| Trealamh Leithlisithe RNA Iomlán Ainmhithe | ||
| Comhpháirteanna Kit | RE-03011 | RE-03014 |
| 50 T | 200 T | |
| Maolán RL1* | 25ml | 100ml |
| Maolán RL2 | 15ml | 60ml |
| Maolán RW1* | 25ml | 100ml |
| Maolán RW2 | 24ml | 96ml |
| RNase-Free ddH2O | 10ml | 40ml |
| Colún RNA amháin | 50 | 200 |
| Colún Glanadh DNA | 50 | 200 |
| Lámhleabhar Treoraithe | 1 píosa | 1 píosa |
Faisnéis táirge
| Formáid | Colún casadh | Comhpháirt íonú | Colún Foregene, imoibrí |
| Flosc | 1-24 sampla | Am in aghaidh an ullmhúcháin | ~30 nóim (24 sampla) |
| Lártheifneoir | Lártheifneoir deisce | Scaradh pirealú | Scaradh lártheifeacha |
| Sampla | Fíochán ainmhithe;cill | Méid samplaí | Fíocháin: 10-20 mg;Cill:(1-5)×106 |
| Toirt elution | 50-200 μL | Uasmhéid luchtaithe | 850 μL |
Gnéithe agus buntáistí
■ Ní gá a bheith buartha faoi dhíghrádú RNA;tá an córas iomlán saor ó RNase
■ Bain úsáid as DNA go héifeachtach le Colún Glantacháin DNA
■ Bain DNA gan DNase a chur leis
■ Simplí - cuirtear na hoibríochtaí go léir i gcrích ag teocht an tseomra
■ Is féidir Fast -operation a chur i gcrích i 30 nóiméad
■ Sábháilte - níl aon imoibrí orgánach ag teastáil
■ Ard-íonacht -OD260/280≈1.8-2.1
Feidhmchlár Kit
Tá sé oiriúnach chun RNA iomlán a eastóscadh agus a íonú ó éagsúlacht fíocháin ainmhithe úra nó reoite nó cealla saothraithe.
Paraiméadair táirge
■ Iarratais anuas: sintéis cDNA den chéad snáithe, RT-PCR, clónáil mhóilíneach, Northern Blot, etc.
■ Samplaí: fíocháin ainmhithe, cealla saothraithe
■ Dáileog: Fíocháin 10-20mg, Cealla(2-5)×106
■ Cumas ceangailteach DNA uasta de cholún íonúcháin: 80 μg
■ toirt elution: 50-200 μl
Léaráid
Trealamh Leithlisithe RNA Iomlán Ainmhithe cóireáilte 20mg
Samplaí luch úra, glac RNA iomlán íonaithe 5 1% agar
Leictreafóiréis Glycogel
1: Spleen 2: Duán
3: Ae 4: Croí
Stóráil agus seilfré
Is féidir an trealamh a stóráil ar feadh 24 mí ag teocht an tseomra (15-25 ℃) nó 2-8 ℃ ar feadh tréimhse níos faide.Is féidir Maolán RL1 a stóráil ag 4 ℃ ar feadh 1 mhí tar éis β- mercaptoethanol (roghnach) a chur leis.
Ailt a luadh
1.IF: 18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., et al.Nanacháithníní cosúil le Lipidí Luchtaithe mRNA d'Eagarthóireacht Bhunáit Ae Trí Dhearadh Ilchodach Lárnach a Bharrfheabhsú.Adv.Feidhm.Mater.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.Má tá: 18.187:He X, Hong W, Yang J, et al.Feidhmíonn apoptosis spontáineach cealla in ullmhúchán gascheall teiripeach éifeachtaí inmunomodulatory trí phosphatidylserine a scaoileadh.Tarchur Comhartha Sprioc Ther.2021 14 Iúil; 6(1):270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.MÁ: 17.97:Dai Z, Liu H, Liao J, et al.Feabhsaíonn modhnú tRNA N7-Methylguanosine aistriúchán mRNA oncogenic agus cuireann sé chun cinn dul chun cinn cholangiocarcinoma intrahepatic.Cill Mol.2021 29 Iúil:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.IF: 9.225:Cao X, Shu Y, Chen Y, et al.Modhnú Mettl14-M6A Idirmheánach Éascaíonn sé Athghiniúint ae trí Hoiméastáis Reticulum Endoplasmic a Chothabháil.Cill Mol Gastroenterol Hepatol.2021; 12(2):633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
Feisteáin leithlisithe RNA do foinsí samplacha eilear fáil:
Ceall, planda, víreasach, fuil, etc.
Ní bhaintear RNA nó tá táirgeacht RNA íseal
Is minic go mbíonn fachtóirí éagsúla ann a théann i bhfeidhm ar éifeachtúlacht aisghabhála, mar shampla: ábhar RNA sampla fíocháin, modh oibríochta, toirt elution, etc.
1. Rinneadh lártheifneoiriú folctha oighir nó crióigineach (4 °C) le linn oibríochta.
Moladh: Oibriú ag teocht an tseomra (15-25 ° C) le linn an phróisis iomláin, ná folcadáin oighir agus lártheifneoir ag teocht íseal.
2. Caomhnú samplach míchuí nó am stórála samplach iomarcach.
Moladh: Stóráil samplaí ag -80 °C nó reo i nítrigin leachtach agus seachain úsáid reo-leá arís;déan iarracht fíochán úr nó cealla saothraithe a úsáid le haghaidh eastóscadh RNA.
3. lysis sampla neamhleor.
Moladh: Nuair a dhéantar fíocháin a homogenú, cinntigh go bhfuil an fíochán homogenized go leor agus go bhfuil na cealla fíocháin roinnte go leor chun scaoileadh RNA a mhíniú.
4. Ní chuirtear an t-eilimint leis i gceart.
Moladh: Deimhnigh go bhfuil ddH saor ó RNase2Cuirtear O le drogall ar lár an scannáin cholúin íonúcháin.
5. Níor cuireadh an méid ceart eatánóil absalóideach le Buffer RL2 nó Buffer RW2.
Moladh: Lean na treoracha, cuir an méid ceart eatánóil absalóideach le Buffer RL2 agus Buffer RW2 agus measc go maith sula n-úsáideann tú an trealamh.
6. Níl dáileog sampla fíocháin oiriúnach.
Moladh: Úsáid 10-20 mg fíocháin nó (1-5) × 106cealla in aghaidh 500 μl maolán RL1, toisc go bhféadfadh eastóscadh RNA laghdaithe a bheith mar thoradh ar úsáid iomarcach fíocháin.
7. Toirt elution míchuí nó elution neamhiomlán.
Moladh: Is é méid elution an cholúin íonúcháin 50-200 μl;mura bhfuil an éifeacht elution sásúil, moltar an t-am socrúcháin teocht an tseomra a leathnú tar éis ddH RNase-Free réamhthéite a chur leis2O, m.sh. ar feadh 5-10 min.
8.Tá iarmhar eatánóil ag an gcolún íonú tar éis nigh Buffer RW2.
Moladh: Má tá iarmhar eatánól tar éis níocháin Buffer RW2, lártheifneoiriú feadán folamh ar feadh 1min, is féidir an t-am le haghaidh oibríocht lártheifneoirithe feadán folamh a mhéadú go 2min, nó is féidir an colún íonú a chur ag teocht an tseomra ar feadh 5 nóiméad chun an eatánól iarmharach a bhaint go leordhóthanach.
Tá RNA íonaithe díghrádaithe
Tá baint ag cáilíocht an RNA íonaithe le fachtóirí cosúil le caomhnú an tsampla, éilliú RNase, agus ionramháil, etc.
1. Ní choinnítear samplaí fíocháin in am.
Moladh: Mura n-úsáidtear samplaí fíocháin nó cealla go tráthúil tar éis iad a bhailiú, crióchoimeád láithreach ag -80 °C nó nítrigin leachtach.Chun RNA a bhaint as, bain úsáid as sampla fíocháin nó cealla nua-thógtha nuair is féidir.
2. Samplaí fíocháin a reo arís agus arís eile.
Moladh: Agus samplaí fíocháin á stóráil, is fearr iad a ghearradh ina bpíosaí beaga le caomhnú, agus ceann de na píosaí a bhaint agus iad á n-úsáid chun reo-leá an tsampla arís agus arís eile agus díghrádú RNA a sheachaint.
3. Tugtar isteach RNase nó gan lámhainní indiúscartha, maisc, etc. a chaitheamh le linn na hoibríochta.
Moladh: Is fearr turgnaimh eastósctha RNA a dhéanamh i seomraí ionramhála RNA ar leith agus déantar an tábla a ghlanadh roimh an turgnamh.
Caith lámhainní agus maisc indiúscartha le linn an turgnaimh chun díghrádú RNA de bharr tabhairt isteach RNase a íoslaghdú.
4. Tá imoibrithe éillithe le RNase le linn úsáide.
Moladh: Fearas nua Leithlisithe RNA Iomlán Ainmhithe a chur ina ionad le haghaidh turgnaimh ghaolmhara.
5. Tá na feadáin lártheifneora, leideanna, etc. a úsáidtear i ionramháil RNA éillithe le RNase.
Moladh: Deimhnigh go bhfuil na feadáin lártheifneoir, na leideanna, na pípéid, etc. a úsáidtear in eastóscadh RNA ar fad saor ó RNase.
Bíonn tionchar ag RNA a fhaightear íonaithe ar thurgnaimh iartheachtacha
RNA íonaithe ag an gcolún íonú, má tá na hiain salainn, tá cion próitéin ró-mhór, beidh tionchar acu ar an turgnamh le sruth, mar shampla: trascríobh droim ar ais, Northern Blot et al.
1. Tá iarmhair ian salainn ag an RNA elutioned.
Moladh: Deimhnigh go bhfuil an toirt ceart eatánóil curtha le Buffer RW2 agus déan 2 nite colún íonúcháin ag an luas lártheifeacha atá sonraithe le haghaidh oibriú;má tá aon iarmhar ian salainn ann, fág an colún íonúcháin go Buffer RW2 ar feadh 5 nóiméad ag teocht an tseomra agus déan lártheifneoiriú chun deireadh a chur le héilliú salainn a uasmhéadú.
2. Iarmhar eatánóil in RNA elutioned.
Moladh: Deimhnigh, tar éis níocháin maolán RW2, an oibríocht lártheifneoirithe feadán folamh a dhéanamh ag an luas lártheifneoirithe atá sonraithe le haghaidh oibríochta, am oibríocht lártheifneoirithe an fheadáin fholamh a mhéadú go 2 nóiméad má tá iarmhar eatánóil ann fós, nó é a fhágáil ag teocht an tseomra ar feadh 5 nóiméad tar éis lártheifneoiriú an fheadáin fholamh chun deireadh a chur le hiarmhar eatánóil a uasmhéadú.
