(96-go maith) QuickEasy Cell Direct RT-qPCR Kit - SYBR Green I
Cur síos
Tá an(96-go maith) QuickEasyTM Kit Cill Díreach RT-qPCR–SYBR Glas Isoláthraíonncóras maolánach lysis uathúilto scaoileadh RNA go tapaó chill saothraithesamplaí le haghaidh imoibrithe RT-qPCR, deireadh a chur leis an am-íditheach agus laboriousPróiseas íonú RNA, agus ní thógann sé ach 7 nóiméad chun an teimpléad RNA riachtanach a fháil.Tá an5 × Meascán RT Díreachagus2 × Díreach qPCR Measc-SYBRar fáil sa bhosca is féidir go tapa agusa fháil go héifeachtach fíor-ama cainníochtúilTorthaí PCR.
Tá lamháltas láidir coscaire ag 5 × Direct RT Mix agus 2 × Direct qPCR Mix-SYBR, agus is féidir leo lysate an tsampla a úsáid chun a thástáil mar theimpléad le haghaidh trascríobh droim ar ais éifeachtach agus aimpliú sonrach.Cuimsíonn an t-imoibrí Foregene Reverse Transcriptase uathúil a bhfuil ard-chleamhnas aige do RNA , chomh maith le Hot D- Taq DNA Polymerase , dNTPs , MgCl2 , maolán imoibrithe, optimizer PCR agus cobhsaitheoir, agus is féidir é a úsáid i gcomhar leis an maolán lysis chun an sampla a bhrath go tapa, go héasca agus go cruinn, agus tá tréithe íogaireacht ard, sainiúlacht láidir agus cobhsaíocht mhaith aige.
Tá an trealamh dírithe ar lysis micrea-chórais de chealla dea-shaothraithe 96, agus tá aonfhoirmeacht agus comhsheasmhacht maith aige;Soláthraíonn na comhpháirteanna feiste 96 imoibriú lysis, 96 frithghníomh trascríobh droim ar ais agus imoibrithe 96 × 2 qPCR, ar féidir leo an pláta cealla 96-tobar a chomhlíonadh le haghaidh úsáid aonuaire, ag seachaint an truaillithe de bharr oscailt arís agus arís eile, reo agus leá imoibrithe agus díghrádú feidhmíochta imoibrí.
Comhpháirteanna Kit
| Comhdhéanamh Kit ( 50 μCóras L lysis/20 μLRT córas imoibrithe /20μCóras imoibrithe L qPCR) | DRT-03011 | Athmharc | |
| 96T | |||
| CuidI | MaolánCL | 5 ml | cillLisis |
| EachtrannachProtease Plus II | 100 μL | ||
| MaolánST | 500 μL | ||
| Cuid II | DNAScriosán | 100 μL | |
| 5 × Meascán RT Díreach | 400 μL | RT | |
| 2 × Meascán qPCR Díreach-SYBR | 1 mL ×2 | qPCR | |
| 50 × ROX Tagartha dath | 400µL | ||
| RNase- SaorddH2 O | 1.7mL |
| |
| Mbliantúil | 1 píosa | 1 ag freastal | |
*: Tá an scriosán DNA imoibrí lysis san áireamh i gCuid II den trealamh;Is féidir comhpháirteanna Cell Lysis, RT, agus qPCR a cheannach ar leithligh.
Gnéithe agus buntáistí
■Simplí agus éifeachtach : le teicneolaíocht Cell Direct RT, is féidir samplaí RNA a fháil i díreach 7 nóiméad.
■ Tá an t-éileamh samplach beag, chomh híseal agus is féidir 10 gcealla a thástáil.
■ Tréchur ard: féadann sé RNA a bhrath go tapa i gcealla saothraithe i 384, 96, 24, 12, plátaí 6 thobair.
■ Is féidir le scriosán DNA géanóim scaoilte a bhaint go tapa, an tionchar ar thorthaí turgnamhacha ina dhiaidh sin a laghdú go mór.
■ Déanann córas optamaithe RT agus qPCR an trascríobh droim ar ais RT-PCR dhá chéim níos éifeachtaí agus PCR níos sainiúla, agus níos resistant d'inhibitors imoibriú RT-qPCR.
Feidhmchlár Kit
Scóip an iarratais: cealla saothraithe.
- RNA arna scaoileadh ag lysis samplach: infheidhme ach amháin maidir le teimpléad RT-qPCR den trealamh seo.
- Is féidir an trealamh a úsáid chun na críocha seo a leanas: anailís ar léiriú géine, fíorú éifeacht tosta géine trí mheán siRNA, scagadh drugaí, etc.
Stóráil agus Seilfré
Ba cheart Cuid I den trealamh seo a stóráil ag 4℃;Ba chóir Cuid II a stóráil ag -20 ℃.
Ba cheart Foregene Protease Plus II a stóráil ag 4℃, ná reoite ag -20 ℃.
Imoibrí 2×Ba chóir go díreach qPCR Mix-Taqman a stóráil ag -20℃sa dorchadas ;má úsáidtear é go minic, is féidir é a stóráil ag 4 freisin℃ le haghaidh stórála gearrthéarmach (úsáid suas laistigh de 10 lá).
Prionsabail deartha fíor-ama PCR primer
Ar Aghaidh Primer agus Droim ar ais Primer
Maidir le PCR Fíor-ama, tá dearadh primer an-tábhachtach.Tá baint ag primers le sainiúlacht agus le héifeachtúlacht an aimplithe PCR, agus is féidir iad a dhearadh ag tagairt do na prionsabail seo a leanas:
- Fad primer: 18-30bp.
- Ábhar GC: 40-60%.
- Luach Tm: Is féidir le bogearraí deartha primer, mar shampla Primer 5, luach Tm an primer a thabhairt.Ba cheart go mbeadh luachanna Tm na bpriméirí in aghaidh an tsrutha agus iartheachtach chomh gar agus is féidir.Is féidir an fhoirmle ríomh Tm a úsáid freisin: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Nuair a bhíonn PCR á fheidhmiú, roghnaítear teocht faoi bhun luach an primer Tm de 5 °C mar an teocht anáil (is féidir leis an méadú comhfhreagrach ar an teocht annealaithe sainiúlacht an imoibrithe PCR a mhéadú).
- Primers agus táirgí PCR:
- Dearadh primer PCR fad táirge aimpliú is fearr 100-150bp.
- Ba cheart primers dearaidh i limistéar struchtúrach tánaisteach an teimpléid a sheachaint oiread agus is féidir.
- Seachain foirmiú 2 bhonn chomhlántacha nó níos mó idir na 3′ foircinn na primers in aghaidh an tsrutha agus le sruth.
- Ní féidir le bonn teirminéil primer 3′ a bheith i láthair le 3 G nó C breise as a chéile.
- Ní féidir struchtúir chomhlántacha a bheith ag na primers féin, nó cruthófar struchtúr hairpin, a dhéanann difear d'aimpliú PCR.
- Ba cheart ATCG a dháileadh chomh cothrom agus is féidir sa seicheamh primer, agus ba cheart an bonn teirminéil 3′ a sheachaint mar T.
Aguisín1:Cell DíreachRT-qPCR Comhpháirt Kitt pacáiste forlíonta
Réiteach Lysis 1.Cell
| Réiteach Lysis Cell | |||
| Comhpháirteanna Kit (córas lysis 24-tobar / tobar) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 T | 500 T | ||
| Cuidmé | Maolán CL | 20 ml | 100 ml |
| Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
| Maolán ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
| CuidII | Léirscriosán DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
| Meascán RT | |
| Comhpháirteanna Kit (córas imoibrithe 20 μl) | DRT-01011-B1 |
| 200 T | |
| 5 × Meascán RT Díreach | 800 μl |
| RNase-DDH saor in aisce2O | 1,7 ml × 2 |
| Meascán qPCR | ||
| Comhpháirteanna Kit (córas imoibrithe 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
| 200 T | 1000 T | |
| 2 × Díreach qPCR Measc-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
| Dath Tagartha 20 × ROX | 40 μl | 200 μl |
| RNase-DDH saor in aisce2O | 1.7 ml | 10 ml |
Lámhleabhair Treoraithe:
