Foreasy Taq DNA Polymerase
Cur síos
Is einsím Taq nua é Foreasy Taq DNA Polymerase a chuirtear in iúl i mbaictéar innealtóireachta Escherichia coli trí theicneolaíocht athcheangail géine.Tá gníomhaíocht áirithe tosaithe te ag an einsím féin agus is féidir é a úsáid le haghaidh PCR traidisiúnta agus qPCR;tá gníomhaíocht pholaiméiráis DNA 5'→3' aige agus gníomhaíocht exonuclease 5'→3', ach níl aon ghníomhaíocht exonuclease 3'→5' aige.
Comhpháirteanna Kit
Comhpháirt | IM-01011 | IM-01012 | IM-01013 |
Foreasy Taq DNA Polymerase(5 U/μL) | 5000 U (1 mL) | 50 KU (10 mL) | 500 KU (100 mL) |
2 × Maolán Imoibriú Taq | 25 ml × 5 | 250 ml × 5 | 500 mL ×25 |
Gnéithe agus buntáistí
- Sainiúlacht ard: Tá gníomhaíocht tosaithe te áirithe ag an einsím.
- Aimpliú Tapa: 10 sec/kb .
- Teimpléad an-inoiriúnaithe: is féidir é a úsáid chun GC Ard-luach, teimpléid éagsúla deacair a mhéadú a mhéadú go héifeachtach.
- Fidelity láidir: gnáth-Einsím Taq 6 huaire.
- Cobhsaíocht theirmeach láidir: Is féidir é a chur ag 37 ° C ar feadh seachtaine agus coinníonn sé níos mó ná 90% de ghníomhaíocht
Feidhmchlár Kit
Córais PCR/qPCR éagsúla agus córais PCR díreacha
Aimpliú PCR ar blúirí DNA
Lipéadú DNA
Seicheamhú DNA
PCR A-tailed
U Sainmhíniú
1U: An méid einsím a theastaíonn chun 10 nmol de dhéocsanúicléatídí a ionchorprú in ábhar dothuaslagtha aigéid agus úsáid á baint as DNA speirme bradán gníomhachtaithe mar theimpléad/primer ar feadh 30 nóiméad ag 74°C.
Coinníoll Frithghníomh
Teocht | Am | Rothaíocht |
37°C | 5 nóiméad | 1 |
94°C | 5 nóiméad | 1 |
94°C | 10 Soic | 35 |
60°C | 10 Soic | |
72°C | 20 soicind/kb | |
72°C | 2 nóiméad | 1 |
Stóráil
-20 ± 5 °C ar feadh 2 bhliain nó ag -80 °C le haghaidh stórála fadtéarmach.
Gan aon chomharthaí aimpliúcháin
1.Cailleann an Taq DNA Polymerase sa trealamh a ghníomhaíocht mar gheall ar stóráil míchuí nó dul in éag an trealamh.
Moladh: Deimhnigh coinníollacha stórála an trealaimh;cuir méid cuí de Taq DNA Polymerase leis an gcóras PCR nó ceannaigh Kit PCR Fíor-Ama nua le haghaidh turgnaimh ghaolmhara.
2.Tá a lán coscairí de Taq DNA Polymerase sa teimpléad DNA.
Moladh: Athghlan an teimpléad nó laghdaigh méid an teimpléid a úsáidtear.
3. Níl an tiúchan Mg2+ oiriúnach.
Moladh: Is é an tiúchan Mg2+ den 2 × Real PCR Mix a chuirimid ar fáil ná 3.5mM.Mar sin féin, i gcás roinnt primers agus teimpléid speisialta, d'fhéadfadh an tiúchan Mg2+ a bheith níos airde.Mar sin, is féidir leat MgCl2 a chur leis go díreach chun an tiúchan Mg2+ a bharrfheabhsú.Moltar an Mg2+ 0.5mM a mhéadú gach uair le haghaidh optamaithe.
4. Níl na coinníollacha aimplithe PCR oiriúnach, agus tá an t-ord primer nó an tiúchan míchuí.
Moladh: dearbhaigh cruinneas an t-ord primer agus nach bhfuil an primer díghrádaithe;mura bhfuil an comhartha aimplithe maith, déan iarracht an teocht annealing a ísliú agus an tiúchan primer a choigeartú go cuí.
5.Tá an méid teimpléad ró-bheag nó ró-iomarca.
Moladh: Déan caolú grádán líneála teimpléad, agus roghnaigh an tiúchan teimpléad leis an éifeacht PCR is fearr le haghaidh turgnamh PCR Fíor-ama.
Tá luach fluaraiseachta ró-ard ag NTC
Éilliú 1.Reagent ba chúis leis le linn oibriú.
Moladh: Imoibrithe nua a chur in ionad turgnaimh PCR Fíor-ama.
2.Contamination tharla le linn ullmhú an chórais imoibrithe PCR.
Moladh: Glac bearta cosanta riachtanacha le linn oibriú, mar shampla: lámhainní laitéis a chaitheamh, tip pípéad a úsáid le scagaire, etc.
3. Tá na primers díghrádaithe, agus beidh díghrádú na primers ina chúis le aimpliú neamh-shonrach.
Moladh: Úsáid leictreafóiréis SDS-PAGE chun a fháil amach an bhfuil na primers díghrádaithe, agus cuir primers nua ina n-ionad le haghaidh turgnaimh PCR Fíor-Ama.
Dimer primer nó aimpliú neamhshonrach
Níl an tiúchan 1.The Mg2+ oiriúnach.
Moladh: Is é an tiúchan Mg2+ den 2 × Real PCR EasyTM Mix a chuirimid ar fáil ná 3.5 mM.Mar sin féin, i gcás roinnt primers agus teimpléid speisialta, d'fhéadfadh an tiúchan Mg2+ a bheith níos airde.Mar sin, is féidir leat MgCl2 a chur leis go díreach chun an tiúchan Mg2+ a bharrfheabhsú.Moltar an Mg2+ 0.5mM a mhéadú gach uair le haghaidh optamaithe.
2.Tá an teocht annealing PCR ró-íseal.
Moladh: Méadú ar an teocht anála PCR faoi 1 ℃ nó 2 ℃ gach uair.
3.Tá an táirge PCR ró-fhada.
Moladh: Ba cheart go mbeadh fad an táirge PCR Fíor-Ama idir 100-150bp, nach mó ná 500bp.
4.Tá na primers díghrádaithe, agus beidh an chuma ar aimpliú ar leith mar thoradh ar dhíghrádú na primers.
Moladh: Úsáid leictreafóiréis SDS-PAGE chun a fháil amach an bhfuil na primers díghrádaithe, agus cuir primers nua ina n-ionad le haghaidh turgnaimh PCR Fíor-Ama.
5.Tá an córas PCR míchuí, nó tá an córas ró-bheag.
Moladh: Tá an córas imoibrithe PCR ró-bheag agus laghdóidh an cruinneas braite.Is fearr an córas imoibrithe atá molta ag an ionstraim PCR cainníochtúil a úsáid chun an turgnamh PCR Fíor-Ama a ath-reáchtáil.
Droch-atrialltacht luachanna cainníochtúla
1.Tá an ionstraim mífheidhmiú.
Moladh: D'fhéadfadh go mbeadh earráidí idir gach poll PCR den ionstraim, rud a fhágann go bhfuil droch-atáirgtheacht le linn bainistíochta teochta nó braite.Seiceáil le do thoil de réir threoracha na hionstraime comhfhreagracha.
2. Níl an íonacht samplach go maith.
Moladh: Beidh droch-atáirgtheacht an turgnaimh mar thoradh ar shamplaí neamhíonacha, lena n-áirítear íonacht an teimpléid agus na primers.Is fearr an teimpléad a ath-ghlanadh, agus is fearr na primers a íonú le SDS-PAGE.
3.Tá an córas PCR ullmhúcháin agus am stórála ró-fhada.
Moladh: Bain úsáid as an gcóras PCR Fíor-ama le haghaidh turgnamh PCR díreach tar éis ullmhúcháin, agus ná fág ar leataobh é ró-fhada.
4. Níl na coinníollacha aimplithe PCR oiriúnach, agus tá an t-ord primer nó an tiúchan míchuí.
Moladh: dearbhaigh cruinneas an t-ord primer agus nach bhfuil an primer díghrádaithe;mura bhfuil an comhartha aimplithe maith, déan iarracht an teocht annealing a ísliú agus an tiúchan primer a choigeartú go cuí.
5.Tá an córas PCR míchuí, nó tá an córas ró-bheag.
Moladh: Tá an córas imoibrithe PCR ró-bheag agus laghdóidh an cruinneas braite.Is fearr an córas imoibrithe atá molta ag an ionstraim PCR cainníochtúil a úsáid chun an turgnamh PCR Fíor-Ama a ath-reáchtáil.