Díreach RT-qPCR Kit III
Cur Síos Kit:
◮Déanann Kit RT-qPCR Díreach, ag baint úsáide as Foreasy Reverse Transcriptase agus Foreasy HS Taq DNA Polymerase arna fhorbairt ag Foregene, le maolán imoibrithe uathúil, an trealamh seo le friotaíocht láidir agus comhoiriúnacht, agus is féidir leis an trealamh imoibriúcháin a thástáil go díreach le húsáid córas Foregene Lysis mar theimpléad.Is féidir leis an trealamh seo iarratas a dhéanamh ar threalamh braite aigéid núicléacha COVID-19 agus ar threalamh braite aigéad núicléach baictéir phataigineacha eile.
Cur síos
Soláthraíonn Kit RT-qPCR díreach maolán RT-qPCR pacáistithe ar leithligh (le polaiméaráis DNA Foreasy HS Taq measctha) agus ard-éifeachtachTrascríobh Droim ar Ais Foreasy(MMLV),rud a fhágann go bhfuil sé áisiúil feisteáin chúlchríocha agus coigeartú córais a chruthú, laistigh den fhíorú simplí.
Déanann Kit RT-qPCR Díreach, ag baint úsáide as Foreasy Reverse Transcriptase agus Foreasy HS Taq DNA Polymerase arna fhorbairt ag Foregene, le maolán imoibrithe uathúil, an trealamh seo le friotaíocht láidir agus comhoiriúnacht, agus is féidir leis an trealamh imoibriúcháin a thástáil go díreach le húsáid córas Foregene Lysis mar theimpléad.Is féidir leis an trealamh seo iarratas a dhéanamh ar threalamh braite aigéid núicléacha COVID-19 agus ar threalamh braite aigéad núicléach baictéir phataigineacha eile.
Is féidir an trealamh seo a bheith go díreach mar chomhpháirt den táirge IVD, ag baint úsáide as go héasca agus go tapa.Ní gá ach fíorú éasca a dhéanamh, gan forbairt arís.
Sonraíochtaí
500T, 50,000T
Comhpháirteanna Kit
| Ábhar an trealaimh (córas imoibrithe 20 μL) | IM-05111-03 | IM-05112-03 |
| 500 T | 50,000 T | |
| Foreasy RTranscriptase mhalairt(200 U/μL) | 50 μL×1 | 1 ml×5 |
| 2 × qPCR DíreachMeascán-Taqman | 1 mL ×5 | 500 ml×1 |
| Teagasc | 1 | 1 |
Céimeanna Oibriúcháin
A: Ullmhaigh teimpléad agus imoibrí
1. Teimpléad RNA ullmhaithe a ullmhú (Moltar úsáid a bhaint as trealamh sraithe Foregene Total RNA Leithlisation Kit chun teimpléad RNA a bhaint agus a íonú) nó sampla táirge scoilteadh (Moltar úsáid a bhaint as córas Foregene Lysis), primers sonracha (10 μM) agus ábhair inchaite ábhartha eile, ionstraim.
2. Cuir an Maolán 2 × Direct RT-qPCR, ddH2O saor ó RNase agus 20 × ROX Reference Dye (má tá sé ag teastáil) sa bhosca le leac oighir, rud a fhágann go leáíonn siad go nádúrtha, agus measctar go réidh é.
B: Córas RT-qPCR a ullmhú
Faigh leath toirte maolán imoibrithe an chórais imoibrithe (mar shampla, má tá toirt an chórais 20 μL, caithfidh sé 10 μL 2 × Maolán Díreach RT-qPCR a fháil). Le haghaidhméid comhfhreagrach einsím, molaimid é sinM-MLV: córas imoibrithe 10-30 U/20 μL,TaqDNA polaiméire:Córas imoibrithe 1-2 U/20 μLis é seo ár moladh, ba cheart duit é a thástáil agus a choigeartú), cuir teimpléad RNA, primers sonracha agus tóireadóirí, agus cuir RNase-Free ddH leis2O go 20 μL.Is féidir ullmhúchán sonrach córas imoibrithe RT-qPCR a tharchur chuig an tábla seo a leanas 1.
Tábla 1 : Córas RT-qPCR a ullmhú
| Comhpháirt | Toirt | Tiúchan deiridh |
| 2 × Maolán Díreach RT-qPCR | 10 μL | 1× |
| Trascríobh droim ar ais Foreasy(MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase | 1-2 U | |
| Ar Aghaidh Primer(10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Cúil tosaigh (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Tóraigh(4 μM) | 1 μL | 200nM |
| Teimpléad(RNA nó Lysate) | X μL | |
| Dath Tagartha 20 × ROX | - | 1* |
| RNase- FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Imleabhar Iomlán | 20 μL |
Nóta: Is primers sonracha den spriocghéine iad Forward Primer agus Droim ar Ais.D'fhéadfaí córas an qPCR a choigeartú de réir samhlacha praiticiúla turgnamhacha agus PCR.Molaimid 400nM don tiúchan deiridh den chuid is mó de na primers.Coigeartaigh toirt na primers agus na tóireoirí sonracha de réir an tiúchan ullmhaithe agus an tiúchan deiridh molta, le do thoil.
1*: Roghnaigh tiúchan deiridh oiriúnach ROX Reference Dye de réir ionstraimí cainníochtúla éagsúla PCR.Taispeántar sa tábla seo a leanas an tiúchan ROX Reference Dye is fearr d’ionstraimí cainníochtúla coitianta PCR:
| Ionstraimí cainníochtúla PCR | An tiúchan deiridh de ROX Reference Dye |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/Céim a hAon,srl. | 1 × (mar shampla, cuir dath tagartha 1μl 20 × ROX i gcóras imoibrithe 20 μL leis) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P agus Mx4000, etc. | 0.5 × (mar shampla, cuir dath tagartha 0.5μl 20 × ROX leis i gcóras imoibrithe 20 μL) |
| Ionstraim Roche PCR, ionstraim PCR Bith-Rad, ionstraim PCR cainníochtúil Eppendorf, etc. | Gan ROX Reference Dye |
Stóráil agus Seilfré
Ba chóir an trealamh a stóráil ag -20 ± 5 ℃.Ba chóir é a stóráil láithreach i gcuisneoir teirmeastatach -20 ℃.Is é 2 bhliain an tréimhse bailíochta má dhéantar é a stóráil i riocht cuí.
