Trealamh Aonrúcháin DNA de Chárta Buccal/Cárta FTA um Eastóscadh DNA Géanómach nó Trealamh Íonacháin ó Stáblaí Buccal
Cur Síos Kit:
Glan go tapa DNA géanómach ardchaighdeáin ó shamplaí swab buccal/Cárta FTA.
◮Gan aon éilliú RNase:Leis an gColún DNA Amháin a sholáthraíonn an trealamh is féidir an RNA a bhaint den DNA géanómach gan RNase a chur leis le linn an turgnaimh, rud a chuireann cosc ar an tsaotharlann a bheith éillithe ag RNase eisghineach.
◮Luas tapa:Tá gníomhaíocht níos airde ag Foregene Protease ná próitéasanna den chineál céanna, agus díolama sé samplaí fíocháin go tapa;tá an oibríocht simplí, agus is féidir an oibríocht eastóscadh DNA genomic a chríochnú laistigh de 20-80 nóiméad.
◮Áisiúil:Déantar an lártheifneoiriú ag teocht an tseomra, agus ní gá lártheifneoiriú teocht íseal 4 ° C nó deascadh eatánóil DNA.
◮Sábháilteacht:Níl aon eastóscadh imoibrí orgánach ag teastáil.
◮Ardchaighdeáin:Tá blúirí móra ag an DNA genomic a bhaintear, gan aon RNA, gan aon RNase, agus ábhar ian thar a bheith íseal, ar féidir leo freastal ar riachtanais turgnaimh éagsúla.
◮Córas micrea-elution:Is féidir leis an tiúchan DNA genomic a mhéadú, atá áisiúil le haghaidh braite nó turgnamh le sruth.
Cur síos
Soláthraíonn an trealamh seo modh éifeachtach agus tapa chun DNA géanóm ard-tiúchana a fháil ó táithíní buccal agus Cárta FTA (spotaí fola).Ag baint úsáide as ár gcuideachta's colún casadh membrane shilice uathúil DNA-amháin agus foirmle, in éineacht le Foregene Protease, is féidir ard-tiúchan, ard-chaighdeán DNA genomic a bhaint as i 80 nóiméad.Ceanglaíonn an colún íonúcháin beag atá deartha go speisialta DNA géanómach, agus is féidir an DNA a mhaolú le méid beag (15μl) córas elution chun tiúchan an DNA genomic a fhaightear a mhéadú, atá áisiúil le haghaidh braite nó turgnamh le sruth.Is féidir leis an trealamh sampla amháin nó níos mó a phróiseáil ag an am, agus ní gá substaintí orgánacha a eastóscadh ar nós feanól, clóraform, agus deascadh isopropanol nó eatánól Tógann an próiseas íonú, agus tá an oibríocht simplí agus coigilte ama.
Sonraíochtaí
50 Ullmhúchán
Comhpháirteanna Kit
| Maolán ST1 |
| Maolán ST2 |
| Aicriolaimíd Líneach |
| Maolán PW |
| Maolán WB |
| Maolán EB |
| Protease Foregene |
| DNA-Colún Amháin |
| Treoracha |
Gnéithe agus buntáistí
-Gan éilliú RNase: Leis an gColún DNA Amháin a sholáthraíonn an trealamh is féidir RNA a bhaint as DNA genomic gan RNase a chur leis le linn an turgnaimh, rud a sheachnaíonn an tsaotharlann éillithe ag RNase eisghineach.
-Luas tapa: Tá gníomhaíocht níos airde ag Foregene Protease ná próitéasanna comhchosúla, déanann sé samplaí a dhíleá go tapa;oibriú simplí.
-Áiriúil: Déantar an lártheifneoiriú ag teocht an tseomra, agus ní gá lártheifneoiriú teocht íseal 4 ° C nó deascadh eatánóil DNA.
-Sábháilteacht: Níl aon eastóscadh imoibrí orgánach ag teastáil.
-Cáilíocht ard: Tá blúirí móra, gan RNA, gan aon RNase, agus ábhar ian thar a bheith íseal ag an DNA genomic asbhainte, ar féidir leo freastal ar riachtanais turgnaimh éagsúla.
-Córas micrea-elution: Is féidir leis an tiúchan DNA genomic a mhéadú, atá áisiúil le haghaidh braite nó turgnamh le sruth.
Feidhmchlár Kit
Tá sé oiriúnach chun DNA genomic a íonú ó na samplaí seo a leanas: swabs buccal, Cárta FTA (stains fola).
Stóráil agus Seilfré
-Is féidir an trealamh seo a stóráil ar feadh 12 mhí faoi choinníollacha tirime ag teocht an tseomra (15-25 ° C);más gá é a stóráil ar feadh tréimhse níos faide ama, is féidir é a stóráil ag 2-8 ° C.
Nóta: Má tá sé stóráilte ag teocht íseal, tá an tuaslagán seans maith le deascadh.Sula n-úsáidtear é, déan cinnte an tuaslagán a chur sa trealamh ag teocht an tseomra ar feadh tréimhse ama.Más gá, déan é a réamhthéamh i ndabhach uisce 37°C ar feadh 10 nóiméad chun an deascán a thuaslagadh, agus meascadh é roimh úsáid.
-Tá foirmle uathúil ag réiteach Foregene Protease, atá gníomhach nuair a stóráiltear é ag teocht an tseomra ar feadh i bhfad (3 mhí);beidh a ghníomhaíocht agus cobhsaíocht níos fearr nuair a stóráiltear iad ag 4 ° C, mar sin moltar é a stóráil ag 4 ° C, cuimhnigh gan é a choinneáil ag -20 ° C.
Tá an colún íonú clogged
Sa trealamh seo, san oibríocht eastósctha DNA genómach, tá an colún íonúcháin asaithe go díreach ar an meascán lysis einsímeach samplach gan chéim lártheifneoraithe, agus féadfar an colún íonúcháin a bhacadh mar gheall ar einsímiú neamhiomlán agus slaodacht ard an tsampla.
Is iad na cúiseanna féideartha seo a leanas:
1. Díleá einsímeach neamhiomlán samplaí fíocháin.
Moladh: Is féidir an t-am próiseála samplach de Foregene Protease a shíneadh go cuí nó is féidir an sásar a thógáil tar éis lártheifneoraithe ag 12,000 rpm (~ 13,400 × g) ar feadh 5 nóiméad.
2. Úsáid iomarcach samplaí fíocháin nó fíocháin mhóra.
Moladh: Is fearr gan dul thar 1 swab Buccal sa sampla;má tá an sampla ró-mhór, méadú ar an dáileog de Buffer ST1, Foregene Protease, maolán ST2 dá réir sin.
3. Tá an slaodacht samplach ró-ard.
Moladh: Is féidir samplaí a chaolú go cuí le 10 mM de Tris-HCl roimh eastóscadh DNA géanómaíochta.
4. Tá blúirí den chárta fola tarraingthe.
Moladh: Is féidir an t-am lártheifneoirithe neamhbhuan de chéim 6 d'eastóscadh géanóm láthair fola (Cárta FTA) a leathnú go cuí.
Toradh íseal nó gan aon DNA
Is minic go mbíonn fachtóirí éagsúla ann a théann i bhfeidhm ar tháirgeacht DNA genómach, lena n-áirítear tionscnamh samplach, coinníollacha stórála samplacha, ullmhú samplach, ionramháil, etc.
Ní féidir DNA genomic a fháil le linn eastóscadh
Is iad seo a leanas na cúiseanna féideartha:
1. Tá díghrádú DNA géanómach mar thoradh ar chaomhnú míchuí samplaí nó stóráil rófhada.
Moladh: B’fhearr go ndéanfaí táithíní béil a shampláil as an nua, agus níl sé inmholta táithíní leasaithe a úsáid le haghaidh oibríochtaí asbhainte DNA géanómaíochta;ba cheart go gcinnteodh samplaí spot fola go bhfuil an caighdeán cáilithe agus níor cheart go mbeadh an t-am stórála ró-fhada.
2. D'fhéadfadh sé nach mbainfí aon eastóscadh den DNA géanómach comhfhreagrach as úsáid ró-bheag fíocháin.
Moladh: Lean na treoracha samplála swab buccal sa treoir oibríochta, agus wipe a mhéad uair agus is féidir ionas gur féidir go leor cealla a cheangal leis an swab ó bhéal le haghaidh eastóscadh DNA genomic;le haghaidh eastóscadh sampla fola spot, is féidir an limistéar gearrtha spota fola a mhéadú go cuí.
3. Tá Foregene Protease caomhnaithe go míchuí, rud a fhágann go laghdaítear a ghníomhaíocht nó a dhíghníomhú.
Moladh: Deimhnigh coinníollacha stórála an Foregene Protease nó cuir Foregene Protease nua ina ionad le haghaidh imoibriú einsímeach.
4. Tá caomhnú míchuí ar an trealamh nó an t-am stórála ró-fhada, rud a fhágann gur theip ar roinnt comhpháirteanna sa trealamh.
Moladh: Ceannach feiste leithlisithe DNA swab Buccal nua le haghaidh nósanna imeachta gaolmhara.
5. Ní chuireann Maolán WB eatánól absalóideach.
Moladh: Deimhnigh go gcuireann maolán WB an méid ceart eatánóil absalóideach leis.
6. Ní chuirtear an eluent leis an scannán silicone i gceart.
Moladh: Cuir 65 °C titeann eluent réamh-théamh go lár an scannáin silicone agus fág ag teocht an tseomra ar feadh 5 nóiméad chun cur leis an éifeachtúlacht elution.
DNA géanóm ísealtáirgeachta scoite amach
Is iad na cúiseanna féideartha seo a leanas:
1. Tá díghrádú DNA géanómach mar thoradh ar chaomhnú míchuí samplaí nó stóráil rófhada.
Moladh: B’fhearr go ndéanfaí sampláil úr ar táithíní béil, agus níor cheart táithíní leasaithe a úsáid le haghaidh eastóscadh DNA géanómaíochta.
2. Má tá an méid sampla fíocháin ró-bheag, beidh an t-ábhar DNA genomic a bhaintear níos lú.
Moladh: Lean na treoracha samplála swab ó bhéal sa treoir oibriúcháin, wipe a mhéad uair agus is féidir ionas gur féidir go leor cealla a cheangal leis an swab ó bhéal le haghaidh eastóscadh DNA genomic.
3. Tá Foregene Protease caomhnaithe go míchuí, rud a fhágann go laghdaítear a ghníomhaíocht nó a dhíghníomhú.
Moladh: Deimhnigh coinníollacha stórála an Foregene Protease nó cuir Foregene Protease nua ina ionad le haghaidh imoibriú einsímeach.
4. Fadhbanna eluent.
Moladh: Úsáid Buffer EB le haghaidh elution;má úsáideann ddH2O nó eluents eile, deimhnigh go bhfuil pH an eluate idir 7.0-8.5.
5. Ní chuirtear an t-eluate isteach i gceart dropwise.
Moladh: Cuir titeann eluent chuig lár an scannáin silicone agus fág ag teocht an tseomra ar feadh 5 nóiméad chun éifeachtúlacht elution a mhéadú.
6. Ní bhíonn mórán carntha ag an leacht elution.
Moladh: Úsáid eluent le haghaidh elution DNA genomic mar a cheanglaítear sna treoracha, ar a laghad nach lú ná 15 μl.
Íseal íonacht DNA genómach
Is féidir le teip nó torthaí míshásúla de thurgnaimh iartheachtacha a bheith mar thoradh ar íonacht DNA géanóm íseal, mar shampla: ní féidir einsímí a ghearradh oscailte, ní féidir le PCR an blúire géine spéise a fháil, etc.
Is iad seo a leanas na cúiseanna féideartha:
1. Truailliú heitreapróitéin, truailliú RNA.
Anailís: Níor nite an colún íonú ag baint úsáide as Buffer PW;níor nite an colún íonú nigh Maolán PW ag baint úsáide as an luas lártheifeacha ceart.
Moladh: Cinntigh nach mbíonn aon fhrasaíocht san fhollán roimh eatánól a chur leis;a bheith cinnte go nigh an colún íonú de réir na dtreoracha, agus ní féidir an chéim seo a fhágáil ar lár.
2. Truailliú ian eisíontais.
Anailís: Fágadh colún íonú nigh Maolán WB ar lár nó níor nite ach uair amháin, rud a d'eascair éilliú ianach iarmharach.
Moladh: Bí cinnte Maolán WB a ní 2 uair mar a ordaítear chun hiain iarmharacha a bhaint a oiread agus is féidir.
3. Éilliú einsím RNA.
Anailís: Cuireadh RNases Eachtracha leis an maolán;Bhí oibríocht níocháin PW Maolán mícheart, agus bhí iarmhair RNase mar thoradh air, rud a chuir isteach ar oibríochtaí turgnamhacha RNA iartheachtacha, amhail trascríobh in vitro.
Moladh: Is féidir le feisteáin leithlisithe d'aigéad núicléasach sraith Foregene RNA a bhaint gan RNase a chur leis, mar sin ní gá go gcuirfeadh Kit Aonrú DNA Cárta Swab/FTA buccal RNase leis;a bheith cinnte a leanúint na treoracha le haghaidh Maolán PW colún íonú níocháin, agus ní féidir an chéim seo a fhágáil ar lár.
4. Iarmhar eatánóil.
Anailís: Ní dhearna Buffer WB lártheifneoiriú feadán folamh tar éis an colún íonúcháin a ní.
Moladh: Déan an oibríocht lártheifneoirithe feadán folamh ceart de réir na dtreoracha.
5. Truailliú eisíontais eile.
Anailís: Ní dhéantar réamhchóireáil ar shamplaí sábháilte nó ar shamplaí speisialta.
Moladh: Réamhléigh an sampla go críochnúil mar a ordaítear.
