• Facebook
  • nascthain
  • youtube

Is gnách go mbíonn an cóimheas íseal A260/A230 de bharr eisíontais a bhfuil an tonnfhad uasta ionsúcháin ag 230nm.Feicfimid cad a chuimsíonn na neamhíonachtaí seo:

  • Truailleáin choitianta

    Tonnfhad ionsú

    Éifeacht cóimheas

    Próitéin

    ~230nm agus 280nm

    Laghdú comhuaineach A260/A 280agus A260/A 280cóimheasa

    Guanidine salann

    220-240 nm

    Laghdaigh an A260/A 280cóimheas

    Feanól

    ~270nm

    -

    Trizol

    ~230nm agus 270nm

    Laghdaigh an A260/A 280cóimheas

    EDTA

    ~230nm

    Laghdaigh an A260/A 280cóimheas

    Eatánól

    230-240 nm

    Laghdaigh an A260/A 280cóimheas

 
 
 
Tonnfhad ionsú agus luach codarsnachta na dtruailleán coitianta

Péilliú rotein
Is féidir breathnú ar thruailliú próitéin mar an truailliú is coitianta sa phróiseas eastóscadh aigéid núicléacha.Tá próitéin ann idir an chéim uiscí uachtarach agus an chéim íochtairorgánachchéim .Laghdóidh truailliú an cóimheas idir A260/A280 agus A260/A230 ag an am céanna, agus athróidh an cóimheas A260/A230 níos soiléire ná an cóimheas A260/A280.
Le linn ina dhiaidh sintrascríobh droim ar aisor imoibrithe qPCR, is féidir le hiarmhair próitéine bac nó cur isteach ar fheidhm na heinsíme.Is é an bealach is fearr chun éilliú próitéine a sheachaint ná an prionsabal “seachas níos lú ná níos mó, méid beag go minic” a choinneáil i gcuimhne agus an comhshnáthán á asú.

2. Truailliú Guanidinium
Tá éifeacht ag hidreaclóiríd (GuHCl) agus guanidine thiocyanate (GTC) próitéiní a dhínádúrú, ar féidir leo seicní cille a scriosadh go tapa le linn an phróisis eastósctha aigéid núicléacha, rud a fhágann dínádúrú próitéine agus deascadh.Tá tonnfhad ionsú GuHCl agus GTC idir 220-240 nm, agus is é anlaghdóidh salann guainidiniam iarmharach an cóimheas A260/A230.Cé go laghdóidh an salann guanidinium iarmharach an cóimheas,is beag an tionchar ar thurgnaimh iartheachtacha i ndáiríre.

3. Éilliú Trizol
Is é an príomh-chomhpháirt de Trizol feanól.Is é príomhfheidhm feanól cealla a lyse agus próitéiní agus substaintí aigéid núicléacha a scaoileadh i gcealla.Cé gur féidir le feanól próitéiní a dhínádúrú go héifeachtach, ní féidir leis bac a chur ar ghníomhaíocht RNase go hiomlán.Mar sin, cuirtear 8 -hydroxyquinoline , guanidine isothiocyanate , β-mercaptoethanol, etc. le TRIzol chun RNase ingenous agus exogenous a chosc.
Agus RNA ceallacha á bhaint as, is féidir le Trizol na cealla a lyse go tapa agus an núicléas a scaoiltear ó na cealla a chosc, agus laghdóidh an Trizol iarmharach cóimheas A260/A230 go suntasach.
Modh próiseála: Nuair a bhíonn sé lártheifneoirithe, ní mór a thabhairt faoi deara go bhfuil an feanól i Trizol intuaslagtha go héasca sa chéim uisce faoi choinníoll 4 ° agus teocht an tseomra.

4. Iarmhar eatánóil
Úsáidtear eatánól sa phróiseas deiridh chun an DNA a deascadh agus iain salainn a d'fhéadfadh a bheith ceangailte leis an DNA a thuaslagadh.Is é an tonnfhad ionsú is airdebuaic ionsú deeatánól freisin ag 230-240 nm, alaghdófar freisin an cóimheas A260/A230.
Is féidir an modh chun iarmhar eatánóil a sheachaint a athdhéanamh faoi dhó le linn an elution deiridh, ag séideadh sacochall múichear feadh dhá nóiméad chun ligean don eatánól galú go hiomlán sula gcuirtear maolán isteach le haghaidh elution.
Mar sin féin, ba chóir go mbeadh a fhios nach bhfuil sa chóimheas ach innéacs meastóireachta ar cháilíocht RNA.Má dhéantar na hoibríochtaí thuasluaite a rialú go docht, ní bheidh tionchar mór ag an diall idir an cóimheas agus an raon caighdeánach ar thurgnaimh anuas.
Táirgí Gaolmhara:
Trealamh Leithlisithe RNA Iomlán Ainmhithe
Gléasra Trealamh Leithlisithe RNA Iomlán
Cille Iomlán RNA trealamh leithlisiú
Gléasra Trealamh Leithlisithe RNA Iomlán Plus


Am poist: Feabhra-10-2023