Ceisteanna Coitianta le haghaidhTrealamh Leithlisithe RNA Iomlán Ainmhithe

Déantar an anailís seo a leanas ar na fadhbanna a d’fhéadfadh teacht ort ifíochán ainmhithe/eastóscadh RNA cille will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

Ní bhaintear RNA nó tá táirgeacht RNA íseal

Is minic go mbíonn fachtóirí éagsúla ann a théann i bhfeidhm ar éifeachtúlacht aisghabhála, mar shampla: ábhar RNA sampla fíocháin, modh oibríochta, toirt elution, etc.

1. Rinneadh lártheifneoiriú folctha oighir nó crióigineach (4 °C) le linn oibríochta.

Moladh: Oibriú ag teocht an tseomra (15-25 ° C) le linn an phróisis iomláin, ná folcadáin oighir agus lártheifneoir ag teocht íseal.

2. Caomhnú samplach míchuí nó am stórála samplach iomarcach.

Moladh: Stóráil samplaí ag -80 °C nó reo i nítrigin leachtach agus seachain úsáid reo-leá arís;déan iarracht fíochán úr nó cealla saothraithe a úsáid le haghaidh eastóscadh RNA.

3. lysis sampla neamhleor.

Moladh: Nuair a dhéantar fíocháin a homogenú, cinntigh go bhfuil an fíochán homogenized go leor agus go bhfuil na cealla fíocháin roinnte go leor chun scaoileadh RNA a mhíniú.

4. Ní chuirtear an t-eilimint leis i gceart.

Moladh: Deimhnigh go bhfuil ddH saor ó RNase₂Cuirtear O le drogall ar lár an scannáin cholúin íonúcháin.

5. Níor cuireadh an méid ceart eatánóil absalóideach le Buffer RL2 nó Buffer RW2.

Moladh: Lean na treoracha, cuir an méid ceart eatánóil absalóideach le Buffer RL2 agus Buffer RW2 agus measc go maith sula n-úsáideann tú an trealamh.

6. Níl dáileog sampla fíocháin oiriúnach.

Moladh: Úsáid 10-20 mg fíocháin nó (1-5) × 10⁶cealla in aghaidh 500 μl maolán RL1, toisc go bhféadfadh eastóscadh RNA laghdaithe a bheith mar thoradh ar úsáid iomarcach fíocháin.

7. Toirt elution míchuí nó elution neamhiomlán.

Moladh: Is é méid elution an cholúin íonúcháin 50-200 μl;mura bhfuil an éifeacht elution sásúil, moltar an t-am socrúcháin teocht an tseomra a leathnú tar éis ddH RNase-Free réamhthéite a chur leis₂O, m.sh. ar feadh 5-10 min.

8.Tá iarmhar eatánóil ag an gcolún íonú tar éis nigh Buffer RW2.

Moladh: Má tá iarmhar eatánól tar éis níocháin Buffer RW2, lártheifneoiriú feadán folamh ar feadh 1min, is féidir an t-am le haghaidh oibríocht lártheifneoirithe feadán folamh a mhéadú go 2min, nó is féidir an colún íonú a chur ag teocht an tseomra ar feadh 5 nóiméad chun an eatánól iarmharach a bhaint go leordhóthanach.

Tá RNA íonaithe díghrádaithe

Tá baint ag cáilíocht an RNA íonaithe le fachtóirí cosúil le caomhnú an tsampla, éilliú RNase, agus ionramháil, etc.

1. Ní choinnítear samplaí fíocháin in am.

Moladh: Mura n-úsáidtear samplaí fíocháin nó cealla go tráthúil tar éis iad a bhailiú, crióchoimeád láithreach ag -80 °C nó nítrigin leachtach.Chun RNA a bhaint as, bain úsáid as sampla fíocháin nó cealla nua-thógtha nuair is féidir.

2. Samplaí fíocháin a reo arís agus arís eile.

Moladh: Agus samplaí fíocháin á stóráil, is fearr iad a ghearradh ina bpíosaí beaga le caomhnú, agus ceann de na píosaí a bhaint agus iad á n-úsáid chun reo-leá an tsampla arís agus arís eile agus díghrádú RNA a sheachaint.

3. Tugtar isteach RNase nó gan lámhainní indiúscartha, maisc, etc. a chaitheamh le linn na hoibríochta.

Moladh: Is fearr turgnaimh eastósctha RNA a dhéanamh i seomraí ionramhála RNA ar leith agus déantar an tábla a ghlanadh roimh an turgnamh.

Caith lámhainní agus maisc indiúscartha le linn an turgnaimh chun díghrádú RNA de bharr tabhairt isteach RNase a íoslaghdú.

4. Tá imoibrithe éillithe le RNase le linn úsáide.

Moladh: Fearas nua Leithlisithe RNA Iomlán Ainmhithe a chur ina ionad le haghaidh turgnaimh ghaolmhara.

5. Tá na feadáin lártheifneora, leideanna, etc. a úsáidtear i ionramháil RNA éillithe le RNase.

Moladh: Deimhnigh go bhfuil na feadáin lártheifneoir, na leideanna, na pípéid, etc. a úsáidtear in eastóscadh RNA ar fad saor ó RNase.

Bíonn tionchar ag RNA a fhaightear íonaithe ar thurgnaimh iartheachtacha

RNA íonaithe ag an gcolún íonú, má tá na hiain salainn, tá cion próitéin ró-mhór, beidh tionchar acu ar an turgnamh le sruth, mar shampla: trascríobh droim ar ais, Northern Blot et al.

1. Tá iarmhair ian salainn ag an RNA elutioned.

Moladh: Deimhnigh go bhfuil an toirt ceart eatánóil curtha le Buffer RW2 agus déan 2 nite colún íonúcháin ag an luas lártheifeacha atá sonraithe le haghaidh oibriú;má tá aon iarmhar ian salainn ann, fág an colún íonúcháin go Buffer RW2 ar feadh 5 nóiméad ag teocht an tseomra agus déan lártheifneoiriú chun deireadh a chur le héilliú salainn a uasmhéadú.

2. Iarmhar eatánóil in RNA elutioned.

Moladh: Deimhnigh, tar éis níocháin maolán RW2, an oibríocht lártheifneoirithe feadán folamh a dhéanamh ag an luas lártheifneoirithe atá sonraithe le haghaidh oibríochta, am oibríocht lártheifneoirithe an fheadáin fholamh a mhéadú go 2 nóiméad má tá iarmhar eatánóil ann fós, nó é a fhágáil ag teocht an tseomra ar feadh 5 nóiméad tar éis lártheifneoiriú an fheadáin fholamh chun deireadh a chur le hiarmhar eatánóil a uasmhéadú.

Leithlisiú cineálacha samplacha aigéad núicléasaigh

Is féidir le feisteáin leithlisithe RNA Foregene aonrú/eastóscadh RNA iomlán a fháil ó na souces samplacha seo a leanas: Fíochán ainmhithe, planda, cealla, víreasach, fuil, etc.

Conas a stórálfar an trealamh

Stóráil teocht an tseomra ar feadh 24 mhí.