Le déanaí, fuair mé amach rud éigin iontach!Níl a fhios ag go leor gairmithe trialacha ardleibhéil timpeall air fiú roinnt pointí eolais turgnamhacha an-bhunúsacha.

Mar shampla, an féidir leat na ceisteanna seo a leanas a fhreagairt?

An bhfuil difríocht idir OD260 agus A260?Cad a chiallaíonn gach ceann acu?
Is é OD an giorrúchán ar dhlús optúil (dlús optúil), is é A an giorrúchán ionsúcháin (ionsú), tá an dá choincheap mar an gcéanna, is é "dlús optúil" "ionsú", ach tá "dlús optúil" ag teacht leis an gcuid is mó de na caighdeáin náisiúnta agus níos caighdeánaithe.

De ghnáth déanaimid an luach OD a thomhas ag 260nm chun an tiúchan aigéid núicléacha a ríomh, mar sin cad a léiríonn 1OD?
Tá buaic uasta ionsúcháin ag aigéad núicléach ag tonnfhad 260nm, ina bhfuil DNA agus RNA araon, chomh maith le blúirí aigéad núicléacha ilroinnte (is é seo an príomhphointe).
Taifeadadh an luach OD arna thomhas ag tonnfhad 260 nm mar OD260.Má tá an sampla íon, is féidir leis an luach OD260 tiúchan an tsampla aigéid núicléigh a ríomh.
1 OD260=50 μg/ml dsDNA (DNA dúbailte)
=37 μg/ml ssDNA (DNA aonshnáithe)
= 40 μg/ml RNA
=30 μg/ml dNTPs (oligonucleotides)
An bhfuil aon nasc agus difríocht idir RT-PCR, Realtime-PCR agus QPCR?
Tá RT-PCR gearr do PCR Trascríobh Droim ar ais
Fíor-Ama PCR=qPCR, gearr do PCR Fíor-Ama Cainníochtúil
Cé gur cosúil go ngiorraítear PCR Fíor-Ama (PCR cainníochtúil fluaraiseachta fíor-ama) agus PCR Trascríobh Droim ar ais (PCR trascríobh droim ar ais) mar RT-PCR.Ach is é an coinbhinsiún idirnáisiúnta: tagraíonn RT-PCR go sonrach do PCR trascríobh droim ar ais.

Cad iad na nt, bp, agus kb a úsáidtear go coitianta chun cur síos a dhéanamh ar fhad DNA/RNA sa bhitheolaíocht?
nt = núicléitíd
bp = péire bonn péire bonn
kb = kilobase

Ar ndóigh, déarfá nach bhfuil mórán daoine buartha faoi na sonraí beaga seo!Déanann gach duine é seo, agus ní fhiafróidh aon duine díot cad é.Tá a fhios agat go bhfuil sé seo gan ghá, ceart?

Ní hea, ní hea, ní mór é seo a bheith ar eolas agat!mar gheall ar a?
Toisc go dteastaíonn uait alt a phostáil!Deartháir!Cibé an bhfuil tú ag iarraidh céim a bhaint amach nó ag déanamh éachtaí taighde eolaíoch, ní mór duit brath ar ailt chun labhairt!

Ba cheart gurb é eastóscadh aigéid núicléigh an turgnamh is simplí agus is bunúsaí.Cinneann cáilíocht eastóscadh aigéid núicléigh go díreach torthaí na dturgnaimh ina dhiaidh sin.

Cé go bhfuil sé ráite agam go minic, tá go leor cairde fós ann nach bhfuil cúram orthu.An uair seo chinn mé bogadh amach as an alt!

Faisnéis Íosta chun Turgnaimh Cainníochtúla Fíor-Ama PCR a Fhoilsiú, dá ngairtear MIQE, is sraith de threoirlínte maidir le turgnaimh chainníochtúla fhluaraiseachta a seoladh go hidirnáisiúnta, a mholann caighdeáin íosta don fhaisnéis thurgnamhach atá riachtanach chun turgnaimh chainníochtúla PCR fhluaraiseachta a mheas agus chun ailt a fhoilsiú.Trí na coinníollacha turgnamhacha agus na modhanna anailíse a sholáthraíonn an turgnamh, is féidir leis na hathbhreithneoirí meastóireacht níos fearr a dhéanamh ar bhailíocht scéim thurgnamhach an taighdeora.

Is féidir a fheiceáil go bhfuil na míreanna braite seo a leanas molta sa chuid d’eastóscadh aigéid núicléacha,

Léiríonn “E” faisnéis nach mór a sholáthar agus léiríonn “D” faisnéis ba chóir a sholáthar más gá.

Tá an fhoirm an-chasta, go deimhin, ba mhaith liom a rá go gcaithfidh gach duine tosú ó

íonacht (D), toradh (D), sláine (E) agus comhsheasmhacht (E) chun aigéid núicléacha a mheas sna ceithre ghné seo.

De réir nósanna turgnamhacha, labhair ar dtús faoi na modhanna meastóireachta íonachta agus tiúchan.

Is é tomhas OD an modh braite is fearr leat agus is éasca do thurgnamhóirí.Maidir leis an bprionsabal, ní rachaidh mé isteach i sonraí anseo.Úsáideann go leor saotharlanna anois speictreafótaiméadair ultra-mhicreafótach chun anailís chainníochtúil dhíreach a dhéanamh ar shamplaí aigéid núicléigh.Agus an luach ionsúcháin á thaispeáint, tugann an clár go díreach an luach tiúchana (aigéad núicléach, próitéin agus dath fluaraiseacha) agus cóimheasa gaolmhara.Maidir leis an anailís ar an luach OD, Sábháil an pictiúr seo agus beidh tú go maith.

Liosta réitigh luach OD Uilíoch

Mar sin féin, tá cúpla caveat ann nach mór a thabhairt amach duit féin ar leithligh.

(Tar éis an tsaoil, tá a fhios agam go gcaithfidh tú a bheith mar na cinn a shábháil agus fanacht go dtí go mbeidh siad de dhíth ort!)

Nóta 1 Trealamh

Beidh tionchar ag an luach OD ar threalamh éagsúla.Chomh fada agus atá an OD260 laistigh de raon áirithe, tá brí ag luachanna OD230 agus OD280.Mar shampla, is é 0~3A raon ionsúcháin an Eppendorf D30 coitianta ag 260nm, agus tá an NanoDrop One Thermo ag 260nm.Tá an raon ionsúcháin 0.5~62.5A.

Nóta 2Imoibrí caolaithe

Is féidir tionchar a bheith ag caolú imoibrithe éagsúla ar an luach OD.Mar shampla, léamh OD260/280 de RNA íonaithe i pH7.5 10mM Tristá maolán idir 1.9-2.1, agus ituaslagán uiscí neodrachbeidh an cóimheas níos ísle, b'fhéidir ach 1.8-2.0, ach ní chiallaíonn sé seo go n-athraíonn cáilíocht RNA Difríocht.

Nóta 3Substaintí iarmharacha

Cuirfidh substaintí iarmharacha isteach ar chruinneas tomhais tiúchan aigéad núicléasaigh, agus mar sin is gá iarmhair próitéine, feanól, polaisiúicríd agus polyphenol i samplaí aigéad núicléach a sheachaint a oiread agus is féidir.

Mar sin féin, i ndáiríre, is sean-mhodh é eastóscadh le himoibrithe orgánacha.I bhfeisteáin tráchtála, is féidir an éifeacht eastósctha a bhaint amach trí cholún asaithe atá bunaithe ar shilice in éineacht le lártheifneoiriú, ag seachaint imoibrithe orgánacha tocsaineacha agus díobhálacha atá deacair a bhaint, etc. An fhadhb, mar shamplaNí úsáideann trealamh eastósctha aigéid núicléacha Foregene DNase/RNase agus imoibrithe orgánacha tocsaineacha ar feadh na hoibríochta, go tapa agus go sábháilte, agus anéifeacht émaith(Dúirt thaisme go raibh sé maol, ach tá a fhios agam gur mhaith leat a fháil amach).

Sampla 1: Toradh agus íonacht eastósctha DNA genómach

Déanann Kit Leithlisiú DNA Ithir Foregene (DE-05511) samplaí ithreach ó fhoinsí éagsúla a chóireáil, agus tá méid agus íonacht an DNA géanómaigh a fhaightear léirithe sa tábla seo a leanas:
Sampla 2: Toradh agus íonacht eastósctha RNA fíocháin

Phróiseáil Kit Leithlisiú RNA Iomlán Ainmhithe (RE-03012) samplaí fíocháin éagsúla, agus léirítear méid agus íonacht an RNA a fhaightear sa tábla thíos (le haghaidh fíocháin luiche):
Mar sin féin, ná bí ag smaoineamh go bhfuil tú críochnaithe leis an luach OD.An bhfuil cúram ar bith agat de na príomhphointí a tharraing mé chugat sa tosach?

Fógra

Déanfar móilíní aigéid núicléacha ilroinnte a ríomh san ionsúchán freisin.Ag glacadh leis go bhfuil iarmhair DNA genómacha agat san RNA, beidh an chuma ar do luach OD a bheith an-ard, ach ní féidir an tiúchan RNA iarbhír a chinneadh.Cibé an bhfuil do RNA Níl sé soiléir an bhfuil díghrádú ann, agus mar sin ní mór dúinn fós modh meastóireachta cuimsitheach chun breithiúnas níos cruinne a thabhairt, is é sin, an meastóireacht ar sláine aigéad núicléach a luaitear i MIQE.