Cé mhéad atá ar eolas agat

Maidir le Neastóscadh aigéad úicileach

Tús agus deireadh aigéid núicléacha íonaithe

Tá gach rud deacair ag an tús, is é aigéad núicléach íonaithe an ceann is mó

Turgnaimh mhóilíneacha a thionscnamh, le haghaidh turgnaimh ina dhiaidh sin

Bíonn tionchar ríthábhachtach ag rath nó teip.

Is fearr le go leor taighdeoirí eolaíocha speictreafótaiméadar UV rian/ultra-rian mar go bhféadfaidh sé tiúchan aigéid núicléigh agus iarmhair ian próitéine agus salainn a bhrath go simplí, go tapa agus go heacnamaíoch.

Mar is eol dúinn go léir, ciallaíonn A260 luach ionsú aigéad núicléach OD, ciallaíonn A280 luach ionsúcháin tiúchan próitéin OD, ciallaíonn A230 luach ionsúcháin tiúchan ian salainn, ionas gur féidir le A260 tiúchan aigéid núicléacha a thiontú, ciallaíonn A260/280 iarmhar próitéin, ciallaíonn A260/230 iarmhar ian salainn, ach níl sé seo bunaithe ar thorthaí ach líon mór taighdeoirí.traidisiúnta” a chreidiúint gur féidir leis íonacht DNA agus RNA a mhíniú dogo pointe áirithe.Ní hé an t-aon chaighdeán é chun táirgeacht agus íonacht aigéid núicléigh a shainaithint, ní úsáidtear é ach mar thagairt, agus ní “caighdeán óir” é.

Leagann lámhleabhar Thermo Fisher ND-2000 béim ar iontaofacht na dtorthaí tástála

Is é an chúis nach léiríonn na torthaí a fhaightear trí úsáid a bhaint as speictreafótaiméadar UV micrea / ultramicroach ach toradh agus íonacht aigéad núicléach ón taobh, agus tá go leor fachtóirí tionchair (cosán optúil, toirt sampla, tiúchan sampla, luach pH, ​​iain eile a dhéanann difear do thomhas ionsúcháin, etc.), ní gá go mbeadh an luach tomhaiste OD cruinn.Ag an am céanna, mar gheall ar easpa sainiúlachta an ábhair a bhaineann le luach ionsúcháin a chinneadh, tá buaic ionsúcháin ag tonnfhad 260nm ag DNA aon-shnáithe, DNA dúbailte-snáithe, RNA, dNTPanna, agus roinnt próitéiní, agus ní gá gurb é an tiúchan a chinnfidh A260 ina n-aonar ná an DNA fíor nó RNA.Ní féidir tiúchan, ná a shláine agus a dhíghrádú a mheas.

Mar sin, conas cáilíocht ár n-aigéad núicléach íonaithe a mheas?Chomh maith le speictreafótaiméadar UV micrea/ultramicrea a úsáid lena bhrath, tá gá le modhanna cosúil le leictreafóiréis glóthach agarose freisin chun íonacht agus sláine an aigéid núicléigh a thaispeáint go radhairc, agus an tiúchan a léiriú go pointe áirithe.Ar an mbealach seo, tá an toradh aigéad núicléasach agus an íonacht a fhaightear ó thorthaí braite modhanna éagsúla inchreidte.

Comparáid chairte turgnamhach

Baineadh DNA genomic de chealla H1299 ag baint úsáide as feisteáin Eastóscadh DNA de chuid cuideachta A, agus chonacthas éilliú suntasach eisíontais, rud a d'eascair luachanna arda OD

(luach tomhais OD agus electropherogram comhfhreagrach)

Innéacs meastóireachta

An bhfuil “caighdeán óir” ann do tháirgeacht aigéid núicléigh agus do thástáil cháilíochta?

Chomh fada agus is eol dúinn, níl aon mhodh simplí, tapa agus saor ann.Cibé an speictreafótaiméadar, leictreafóiréis glóthach, nó mais-speictriméadracht é, léiríonn siad go léir tiúchan agus íonacht an aigéid núicléigh sa tuaslagán ó ghnéithe éagsúla, agus ní mór iad a mheas trí thagairt a dhéanamh dá chéile.

Is é an t-innéacs meastóireachta is fearr i gcónaían feidhmchlár turgnamhach leantach.Ní chuireann sé isteach ar éifeachtacht trascríobh droim ar ais agus aimpliú PCR.Is éard atá i gceist le heastóscadh rathúil aigéid núicléigh ná táirgí aimpliúcháin iontaofa agus luachanna Ct a fháil, agus seicheamh iomlán a fháil trí sheicheamhú.

Go hachomair, ba cheart an dearcadh ar theoiric cóimheas-amháin a dhúshlánú trí “thorthaí maithe turgnamhacha iartheachtacha a úsáid mar pharaiméadair eastósctha maithe”!

Feisteáin asbhainte RNA DNA Foregene a mholtar chun ardíonacht DNA/RNA a fháil:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/