1: Ionadaigh na soláthairtí turgnamhacha in am

Socraigh rialú diúltach (NTC) agus déan arís é go minic.Chomh luath agus a fhaightear amach go bhfuil éilliú táirge PCR sa tsaotharlann, cuir in ionad na soláthairtí turgnamhacha go léir in am.Mar shampla: na primers a athchaolú agus a ullmhú, an barr pípéad, an fheadán EP, ddH2O, etc. a ath-steiriliú, pípéad nua a chur ina ionad, agus saotharlanna eile a fháil ar iasacht go sealadach chun turgnaimh PCR a dhéanamh.Déanfar an tsaotharlann éillithe a aeráil agus a ionradaithe le gathanna ultraivialait go dtí go ndíchuirfear éilliú an táirge PCR sula rachfar ar aghaidh leis an turgnamh.

2: Leathnaigh am nochtadh UV

Is fiú a thabhairt faoi deara, chun éilliú DNA a bhaint, ba cheart radaíocht ultraivialait rialta a shíneadh 2 uair ná mar is gnách.Mar sin féin, níl éifeacht ionradaíochta UV chun blúirí beaga (faoi bhun 200bp) éillithe DNA a bhaint go maith fós.

Is é an tonnfhad ultraivialait (nm) go ginearálta 254/300nm, agus is leor é a ionradaíocht ar feadh 30 nóiméad.Ba chóir a thabhairt faoi deara, nuair a roghnaíonn sé UV chun deireadh a chur le héilliú táirgí PCR iarmharacha, ba cheart fad an táirge PCR agus dáileadh na mbonn sa seicheamh táirge a mheas.Níl ionradaíocht UV éifeachtach ach amháin le haghaidh blúirí fada os cionn 500 bp, agus níl mórán éifeacht aige ar blúirí gearra.

Le linn ionradaíochta UV, cruthóidh na bunanna pirimidín sa táirge PCR dimers.Is féidir leis na dimers seo an síneadh a fhoirceannadh, ach ní féidir le gach pirimidín sa slabhra DNA dimers a fhoirmiú, agus is féidir le ionradaíocht UV na dimers a bhriseadh freisin..Braitheann an méid foirmiú dimer ar an tonnfhad UV, an cineál dimer pirimidín agus an t-ord na nucleotides in aice leis an suíomh dimer.Dá bhrí sin, má tá na blúirí amplified PCR beag, moltar úsáid a bhaint as córas éillithe táirge frith-PCR UNG.

3: Scavengers truaillithe DNA a úsáidtear go coitianta

Déantar aerasóil a ghiniúint go héasca nuair a chuirtear pípéid leis, rud atá deacair a sheachaint, agus socróidh sé go tapa.Dá bhrí sin, gan amhras is rogha maith é scavengers truaillithe DNA speisialta a úsáid go minic chun scaipeadh truaillithe DNA a chosc.

4: Bain úsáid as córas frith-thruailliú UNG

Tar éis éilliú táirge PCR a bhaint, is féidir leis an saotharlann tástála córas éillithe táirge frith-PCR UNG a úsáid chun éilliú táirge PCR a chosc.I saotharlanna ginearálta, is féidir leat landairí turgnamhacha simplí a dhéanamh, limistéar táirgí PCR a scaradh go docht ó réimsí eile, rialacha agus rialacháin saotharlainne áirithe a bhunú, agus oiliúint ábhartha a dhéanamh chun éilliú táirgí PCR a chosc.

Moltaí: Tá bunú saotharlainne PCR réasúnta, timpeallacht PCR maith a chothabháil, nósanna imeachta oibriúcháin caighdeánacha PCR a fhoirmiú, agus feasacht oibriúcháin dhian na dturgnaimh a chothú na heochracha chun truailliú turgnaimh PCR a chosc nó a laghdú.