An anailís seo a leanas ar fhadhbanna féideartha iBuccalswab/FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

Tá an colún íonú clogged

Sa trealamh seo, san oibríocht eastósctha DNA genómach, tá an colún íonúcháin asaithe go díreach ar an meascán lysis einsímeach samplach gan chéim lártheifneoraithe, agus féadfar an colún íonúcháin a bhacadh mar gheall ar einsímiú neamhiomlán agus slaodacht ard an tsampla.

Is iad na cúiseanna féideartha seo a leanas:

1. Díleá einsímeach neamhiomlán samplaí fíocháin.

Moladh: Is féidir an t-am próiseála samplach de Foregene Protease a shíneadh go cuí nó is féidir an sásar a thógáil tar éis lártheifneoraithe ag 12,000 rpm (~ 13,400× g) ar feadh 5 nóiméad.

2. Úsáid iomarcach samplaí fíocháin nó fíocháin mhóra.

Moladh: Is fearr gan dul thar 1Buccal swab sa sampla;má tá an sampla ró-mhór, méadú ar an dáileog de Buffer ST1, Foregene Protease, maolán ST2 dá réir sin.

3. Tá an slaodacht samplach ró-ard.

Moladh: Is féidir samplaí a chaolú go cuí le 10 mM de Tris-HCl roimh eastóscadh DNA géanómaíochta.

4. Tá blúirí den chárta fola tarraingthe.

Moladh: Is féidir an t-am lártheifneoirithe neamhbhuan de chéim 6 d'eastóscadh géanóm láthair fola (Cárta FTA) a leathnú go cuí.

Toradh íseal nó gan aon DNA

Is minic go mbíonn fachtóirí éagsúla ann a théann i bhfeidhm ar tháirgeacht DNA genómach, lena n-áirítear tionscnamh samplach, coinníollacha stórála samplacha, ullmhú samplach, ionramháil, etc.

Ní féidir DNA genomic a fháil le linn eastóscadh

Is iad seo a leanas na cúiseanna féideartha:

1. Tá díghrádú DNA géanómach mar thoradh ar chaomhnú míchuí samplaí nó stóráil rófhada.

Moladh: B’fhearr go ndéanfaí táithíní béil a shampláil as an nua, agus níl sé inmholta táithíní leasaithe a úsáid le haghaidh oibríochtaí asbhainte DNA géanómaíochta;ba cheart go gcinnteodh samplaí spot fola go bhfuil an caighdeán cáilithe agus níor cheart go mbeadh an t-am stórála ró-fhada.

2. D'fhéadfadh sé nach mbainfí aon eastóscadh den DNA géanómach comhfhreagrach as úsáid ró-bheag fíocháin.

Moladh: Lean anbucal treoracha samplála swab sa treoir oibríochta, agus wipe a mhéad uair agus is féidir ionas gur féidir go leor cealla a cheangal leis an swab ó bhéal le haghaidh eastóscadh DNA genomic;le haghaidh eastóscadh sampla fola spot, is féidir an limistéar gearrtha spota fola a mhéadú go cuí.

3. Tá Foregene Protease caomhnaithe go míchuí, rud a fhágann go laghdaítear a ghníomhaíocht nó a dhíghníomhú.

Moladh: Deimhnigh na coinníollacha stórála dean Foregene Protease nó cuir Foregene Protease nua ina ionad le haghaidh imoibriú einsímeach.

4. Tá caomhnú míchuí ar an trealamh nó an t-am stórála ró-fhada, rud a fhágann gur theip ar roinnt comhpháirteanna sa trealamh.

Moladh: Ceannaigh ceann nuaBuccal DNA swableithlis trealamh le haghaidh nósanna imeachta gaolmhara.

5. Ní chuireann Maolán WB eatánól absalóideach.

Moladh: Deimhnigh go gcuireann maolán WB an méid ceart eatánóil absalóideach leis.

6. Ní chuirtear an eluent leis an scannán silicone i gceart.

Moladh: Cuir 65 leis°Ctiteann eluent réamh-te go lár an membrane silicone agus fág ag teocht an tseomra ar feadh 5 nóiméad chun an éifeachtúlacht elution a mhéadú.

LDNA genomic ow-toradh scoite

Is iad na cúiseanna féideartha seo a leanas:

1. Tá díghrádú DNA géanómach mar thoradh ar chaomhnú míchuí samplaí nó stóráil rófhada.

Moladh: B’fhearr go ndéanfaí sampláil úr ar táithíní béil, agus níor cheart táithíní leasaithe a úsáid le haghaidh eastóscadh DNA géanómaíochta.

2. Má tá an méid sampla fíocháin ró-bheag, beidh an t-ábhar DNA genomic a bhaintear níos lú.

Moladh: Lean na treoracha samplála swab ó bhéal sa treoir oibriúcháin, wipe a mhéad uair agus is féidir ionas gur féidir go leor cealla a cheangal leis an swab ó bhéal le haghaidh eastóscadh DNA genomic.

3. Tá Foregene Protease caomhnaithe go míchuí, rud a fhágann go laghdaítear a ghníomhaíocht nó a dhíghníomhú.

Moladh: Deimhnigh na coinníollacha stórála dethe Foregene Protease nó cuir ceann nua ina ionad Foregene Protease le haghaidh imoibriú einsímeach.

4. Fadhbanna eluent.

Moladh: Úsáid Buffer EB le haghaidh elution;má úsáideann ddH₂O nó eluents eile, deimhnigh go bhfuil pH an eluate idir 7.0-8.5.

5. Ní chuirtear an t-eluate isteach i gceart dropwise.

Moladh: Cuir titeann eluent chuig lár an scannáin silicone agus fág ag teocht an tseomra ar feadh 5 nóiméad chun éifeachtúlacht elution a mhéadú.

6. Ní bhíonn mórán carntha ag an leacht elution.

Moladh: Úsáid eluent le haghaidh elution DNA genomic mar a cheanglaítear sna treoracha, ar a laghadnach lú ná 15μl.

Low íonachta of DNA genomicscoite

Is féidir le teip nó torthaí míshásúla de thurgnaimh iartheachtacha a bheith mar thoradh ar íonacht DNA géanóm íseal, mar shampla: ní féidir einsímí a ghearradh oscailte, ní féidir le PCR an blúire géine spéise a fháil, etc.

Is iad seo a leanas na cúiseanna féideartha:

1. Truailliú heitreapróitéin, truailliú RNA.

Anailís: Níor nite an colún íonú ag baint úsáide as Buffer PW;níor nite an colún íonú nigh Maolán PW ag baint úsáide as an luas lártheifeacha ceart.

Moladh: Cinntigh nach mbíonn aon fhrasaíocht san fhollán roimh eatánól a chur leis;a bheith cinnte go nigh an colún íonú de réir na dtreoracha, agus ní féidir an chéim seo a fhágáil ar lár.

2. Truailliú ian eisíontais.

Anailís: Fágadh colún íonú nigh Maolán WB ar lár nó níor nite ach uair amháin, rud a d'eascair éilliú ianach iarmharach.

Moladh: Bí cinnte Maolán WB a ní 2 uair mar a ordaítear chun hiain iarmharacha a bhaint a oiread agus is féidir.

3. Éilliú einsím RNA.

Anailís: Cuireadh RNases Eachtracha leis an maolán;Bhí oibríocht níocháin PW Maolán mícheart, agus bhí iarmhair RNase mar thoradh air, rud a chuir isteach ar oibríochtaí turgnamhacha RNA iartheachtacha, amhail trascríobh in vitro.

Moladh: Aigéad núicléach sraith Foregeneisolais féidir le feisteáin RNA RNA a bhaint gan RNase breise a chur leis,mar sin Kit Aonrú DNA Cárta Swab/FTA buccalgá't cuir RNase;a bheith cinnte a leanúint na treoracha le haghaidh Maolán PW colún íonú níocháin, agus ní féidir an chéim seo a fhágáil ar lár.

4. Iarmhar eatánóil.

Anailís: Ní dhearna Buffer WB lártheifneoiriú feadán folamh tar éis an colún íonúcháin a ní.

Moladh: Déan an oibríocht lártheifneoirithe feadán folamh ceart de réir na dtreoracha.

5. Truailliú eisíontais eile.

Anailís: Ní dhéantar réamhchóireáil ar shamplaí sábháilte nó ar shamplaí speisialta.

Moladh: Réamhléigh an sampla go críochnúil mar a ordaítear.