Gan aon chomharthaí aimpliúcháin

1.Cailleann an Taq DNA Polymerase sa trealamh a ghníomhaíocht mar gheall ar stóráil míchuí nó dul in éag an trealamh.
Moladh: Deimhnigh coinníollacha stórála an trealaimh;cuir méid cuí de Taq DNA Polymerase leis an gcóras PCR nó ceannaigh Kit PCR Fíor-Ama nua le haghaidh turgnaimh ghaolmhara.

2.Tá a lán coscairí de Taq DNA Polymerase sa teimpléad DNA.
Moladh: Athghlan an teimpléad nó laghdaigh méid an teimpléid a úsáidtear.

3. Níl an tiúchan Mg2+ oiriúnach.
Moladh: Is é an tiúchan Mg2+ den 2 × Real PCR Mix a chuirimid ar fáil ná 3.5mM.Mar sin féin, i gcás roinnt primers agus teimpléid speisialta, d'fhéadfadh an tiúchan Mg2+ a bheith níos airde.Mar sin, is féidir leat MgCl2 a chur leis go díreach chun an tiúchan Mg2+ a bharrfheabhsú.Moltar an Mg2+ 0.5mM a mhéadú gach uair le haghaidh optamaithe.

4. Níl na coinníollacha aimplithe PCR oiriúnach, agus tá an t-ord primer nó an tiúchan míchuí.
Moladh: dearbhaigh cruinneas an t-ord primer agus nach bhfuil an primer díghrádaithe;mura bhfuil an comhartha aimplithe maith, déan iarracht an teocht annealing a ísliú agus an tiúchan primer a choigeartú go cuí.

5.Tá an méid teimpléad ró-bheag nó ró-iomarca.
Moladh: Déan caolú grádán líneála teimpléad, agus roghnaigh an tiúchan teimpléad leis an éifeacht PCR is fearr le haghaidh turgnamh PCR Fíor-ama.

Tá luach fluaraiseachta ró-ard ag NTC

Éilliú 1.Reagent ba chúis leis le linn oibriú.
Moladh: Imoibrithe nua a chur in ionad turgnaimh PCR Fíor-ama.

2.Contamination tharla le linn ullmhú an chórais imoibrithe PCR.
Moladh: Glac bearta cosanta riachtanacha le linn oibriú, mar shampla: lámhainní laitéis a chaitheamh, tip pípéad a úsáid le scagaire, etc.

3. Tá na primers díghrádaithe, agus beidh díghrádú na primers ina chúis le aimpliú neamh-shonrach.
Moladh: Úsáid leictreafóiréis SDS-PAGE chun a fháil amach an bhfuil na primers díghrádaithe, agus cuir primers nua ina n-ionad le haghaidh turgnaimh PCR Fíor-Ama.

Dimer primer nó aimpliú neamhshonrach

Níl an tiúchan 1.The Mg2+ oiriúnach.
Moladh: Is é an tiúchan Mg2+ den 2 × Real PCR EasyTM Mix a chuirimid ar fáil ná 3.5 mM.Mar sin féin, i gcás roinnt primers agus teimpléid speisialta, d'fhéadfadh an tiúchan Mg2+ a bheith níos airde.Mar sin, is féidir leat MgCl2 a chur leis go díreach chun an tiúchan Mg2+ a bharrfheabhsú.Moltar an Mg2+ 0.5mM a mhéadú gach uair le haghaidh optamaithe.

2.Tá an teocht annealing PCR ró-íseal.
Moladh: Méadú ar an teocht anála PCR faoi 1 ℃ nó 2 ℃ gach uair.

3.Tá an táirge PCR ró-fhada.
Moladh: Ba cheart go mbeadh fad an táirge PCR Fíor-Ama idir 100-150bp, nach mó ná 500bp.

4.Tá na primers díghrádaithe, agus beidh an chuma ar aimpliú ar leith mar thoradh ar dhíghrádú na primers.
Moladh: Úsáid leictreafóiréis SDS-PAGE chun a fháil amach an bhfuil na primers díghrádaithe, agus cuir primers nua ina n-ionad le haghaidh turgnaimh PCR Fíor-Ama.

5.Tá an córas PCR míchuí, nó tá an córas ró-bheag.
Moladh: Tá an córas imoibrithe PCR ró-bheag agus laghdóidh an cruinneas braite.Is fearr an córas imoibrithe atá molta ag an ionstraim PCR cainníochtúil a úsáid chun an turgnamh PCR Fíor-Ama a ath-reáchtáil.

Droch-atrialltacht luachanna cainníochtúla

1.Tá an ionstraim mífheidhmiú.
Moladh: D'fhéadfadh go mbeadh earráidí idir gach poll PCR den ionstraim, rud a fhágann go bhfuil droch-atáirgtheacht le linn bainistíochta teochta nó braite.Seiceáil le do thoil de réir threoracha na hionstraime comhfhreagracha.

2. Níl an íonacht samplach go maith.
Moladh: Beidh droch-atáirgtheacht an turgnaimh mar thoradh ar shamplaí neamhíonacha, lena n-áirítear íonacht an teimpléid agus na primers.Is fearr an teimpléad a ath-ghlanadh, agus is fearr na primers a íonú le SDS-PAGE.

3.Tá an córas PCR ullmhúcháin agus am stórála ró-fhada.
Moladh: Bain úsáid as an gcóras PCR Fíor-ama le haghaidh turgnamh PCR díreach tar éis ullmhúcháin, agus ná fág ar leataobh é ró-fhada.

4. Níl na coinníollacha aimplithe PCR oiriúnach, agus tá an t-ord primer nó an tiúchan míchuí.
Moladh: dearbhaigh cruinneas an t-ord primer agus nach bhfuil an primer díghrádaithe;mura bhfuil an comhartha aimplithe maith, déan iarracht an teocht annealing a ísliú agus an tiúchan primer a choigeartú go cuí.

5.Tá an córas PCR míchuí, nó tá an córas ró-bheag.
Moladh: Tá an córas imoibrithe PCR ró-bheag agus laghdóidh an cruinneas braite.Is fearr an córas imoibrithe atá molta ag an ionstraim PCR cainníochtúil a úsáid chun an turgnamh PCR Fíor-Ama a ath-reáchtáil.