• Facebook
  • nascthain
  • youtube

Réamhrá:

Is éard atá i RNA, ainm eolaíoch aigéad ribonúicléach, a ghiorrúchán ó Aigéad RiboNúicléach, ná cineál aigéid núicléasaigh a fhoirmítear trí an iliomad ribonucleotídí ar a laghad a nascadh trí bhannaí fosfadiester.

Is é an bunphrionsabal a bhaineann le RNA a iniúchadh ná RNA Iomlán atá saor ó thruailliú a bhaint as, agus is féidir achoimre a dhéanamh ar bhunphrionsabal eastóscadh RNA mar seo a leanas:

1. Cuir isteach na cealla ar dtús

2. Ansin bain neamhíonachtaí macromolecular (próitéiní, lipidí, DNA, etc.)

3. Ar deireadh, déantar an RNA a deascadh agus salainn agus tuaslagóirí orgánacha a bhaint, agus an RNA a íonú tuilleadh

Modh eastósctha san am a chuaigh thart agus san am i láthair

Is é an chéad ghlúin de mhodh eastóscadh RNA an modh deascadh TRIzol (áirítear imoibrithe a úsáidtear guanidine isothiocyanate, feanól, Clóraform, etc) invented ag seanathair darb ainm Piotr Chomczynski agus grandma Nicoletta Sacchi, toisc go gceadaíonn an aireagán eastóscadh RNA tapa agus éasca, ó shin i leith thosaigh an méadú ar thaighde RNA.

fjghj

Níos déanaí, dhíol Grandpa an paitinn seo le Invitrogen, agus chuir Invitrogen an modh seo chun cinn don domhan agus tháinig sé ina mhodh a úsáidtear go forleathan.

Níos déanaí, fuarthas Invitrogen ag Thermo!

Táirge ionadaíoch: imoibrí TRIzol Invitrogen

cjgh

Mar sin féin, éilíonn modh deascadh TRIzol deascadh iolrach agus eastóscadh RNA, agus tá na himoibrithe a úsáidtear tocsaineach agus tógann sé am fada oibriú.

Dá bhrí sin, tháinig an modh íonú colún-einsím dara glúin i bhfeidhm, ag baint úsáide as membrane glóthach shilice mar ábhar asaithe aigéad núicléach ar leith chun aisghabháil RNA sa sampla a uasmhéadú agus neamhíonachtaí eile a bhaint.

Déanann an modh dara glúin an oibríocht a shimpliú ar bhonn feidhmíochta cobhsaí, laghdaíonn sé an fachtóir riosca, agus feabhsaíonn sé éifeachtacht eastóscadh RNA.

Táirgí ionadaíocha: QIAGEN RNeasy agus an chuid is mó táirgí baile

ghjfgh

Mar sin féin, éilíonn modhanna an chéad agus an dara glúin úsáid DNase chun éilliú DNA a bhaint, rud a thugann roinnt míchaoithiúlacht do thurgnaimh iartheachtacha ina dhiaidh sin.Laghdóidh DNase iarmharach éifeachtúlacht an trascríobh droim ar ais agus laghdóidh sé sintéis cDNA an chéad snáithe, rud a chuireann isteach ar chruinneas na dtorthaí.

Dá bhrí sin, tá an modh eastóscadh tríú glúin optamaithe ar bhonn an dara glúin.Ní gá aon einsímí a chur leis an turgnamh, agus is féidir RNA a fháil go héasca gan ach dhá cholún.

Colún 1: Colún Glantacháin DNA chun DNA a ghlanadh

Colún 2: Colún RNA amháin a adsorbs agus a aisghabhann RNA go sonrach

Ní hamháin go sábhálann oibríocht shimplí den sórt sin am, ach éascaíonn sé oibriú turgnaimh le sruth!

Táirgí ionadaíocha: QIAGEN RNeasy Plus agusEachtrannachRNA táirgí sraith íonú

cgjfgj

(RNeasy Plus)

vghjgh

Foregene'sGléasra Trealamh Leithlisithe RNA Iomlán)

Abair leat go ciúin!Cuireann trealamh RNA Foregene i láthair freisin Léirscriosán RNase atá éasca le húsáid, ar féidir leis 400μg de RNase a bhaint go hiomlán ar an dromchla soladach i 1 nóiméad, gan aon substaintí tocsaineacha a chur leis an gcorp daonna!

Pic1: Cairt comparáide próisis oibriúcháin

cjcghj

Is féidir le táirgí Foregene eastóscadh RNA a chríochnú in dhá amhrán, ná cuir daoine eile in éad le dul chun cinn do thurgnaimh!

Pic2:Etorthaí turgnamhacha chairt comparáide

An chéad ghlúin (1: TRIzol)

An dara glúin (2: RNeasy of QIAGEN)

An tríú glúin (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

ghjghk

Pic3: graf qPCR (graf cuar aimpliúcháin)

An chéad ghlúin (glas ciallaíonn TRIzol -, dearg ciallaíonn TRIzol +)

jhkgjhfg

An dara glúin (ciallaíonn spéir gorm QIAGEN RNeasy-, ciallaíonn dearg QIAGEN RNeasy +)

cjh1

An tríú glúin (ciallaíonn gorm QIAGEN RNeasy plus, ciallaíonn glas Foregene)

fgjgy2

(Nóta: léiríonn graf qPCR “-” nach bhfuil DNase curtha leis agus nár baineadh éilliú DNA. Mar sin, tá an CT níos airde agus níl an toradh cruinn; léiríonn “+” gur cuireadh DNase leis agus gur baineadh an éilliú DNA, tá an toradh cruinn)

Ciallaíonn gach uasghrádú teicniúil go bhfuil feidhmiú an turgnaimh ag forbairt i dtreo níos simplí agus níos éasca le húsáid.

Tá sé mar aidhm ag Foregene cabhrú le níos mó taighdeoirí eolaíocha am agus costas turgnamhach a shábháil, torthaí turgnamhacha ardcháilíochta a fháil, agus éachtaí taighde eolaíoch níos luachmhaire a chruthú i gcomhpháirt.


Am postála: Jul-09-2021